5.细菌的遗传与变异2011中医教学课件.ppt

微生物基因组学（Genomics）是利用全基因组DNA序列研究微生物基因及其功能的学科。 四、微生物基因组学 细菌是研究和分析基因组序列与相关生物学功能关系的理想模式。 首先，用超声波将细菌染色体DNA随机切割成一定大小的DNA片段，插入到测序载体（质粒）中，以构建DNA文库，进行大规模的测序，对DNA序列加以拼接。 1、核苷酸序列测定 四、微生物基因组学 经过计算机分析，完成全基因组各个区域的编号和注释，最后存入数据库，并在互联网上发表，以供全世界的科学家参考和使用。 四、微生物基因组学 细菌全基因组序列测定完成后，更重要的任务是鉴定基因及尽可能确定基因的功能，称之为后基因组学。 2、微生物基因组结构与功能研究 四、微生物基因组学 通常采用开放读码框（ORF）推定、密码子使用和同源性比较等技术鉴定基因。应用生物信息学分析软件，将基因组中的功能性序列序区鉴定出来。 四、微生物基因组学 3、微生物基因组学研究的意义 四、微生物基因组学 ② 转化因子的结合与进入  双链DNA与感受态受体菌表面的DNA结合受体结合。其中一条链被降解产生能量；另一条链与特异DNA结合蛋白形成复合物，进入菌体内。 三、细菌的基因转移与重组 ③ 转化因子的整合 单链DNA不经复制，与受体菌同源DNA区段的单链配对，被取代的受体菌DNA单链被降解，最终产生转化子。 三、细菌的基因转移与重组 2、接合（conjugation） 三、细菌的基因转移与重组 接合：供体菌通过性菌毛与受体菌直接接触，并将遗传物质（主要是质粒DNA）转移给受体菌，使受体菌获得新的遗传性状。 三、细菌的基因转移与重组 质粒 质粒接合转移示意图 染色体 性菌毛 受体菌 供体菌 三、细菌的基因转移与重组 F质粒的接合 F+×F－ 高频重组菌（high frequency recombination,Hfr） F′ F+ 、 Hfr、 F′都为雄菌 接合（conjugation） 三、细菌的基因转移与重组 F+ F+ Hfr 2）接合（conjugation） 三、细菌的基因转移与重组 Hfr F- Hfr F- Hfr F- Hfr F- 接合（conjugation） 三、细菌的基因转移与重组 F’ F’ F’ F’ F’ F- F’ F- 接合（conjugation） 三、细菌的基因转移与重组 赋予宿主菌的耐药性 编码性菌毛，决定自主复制与接合转移 耐药性（R）质粒 三、细菌的基因转移与重组 R质粒主要以接合方式从耐药菌传递给敏感菌，使后者变为耐药菌。 R质粒在同一种属或不同种属细菌之间传递，造成耐药性的广泛传播，尤其在肠道杆菌中比较普遍，给临床治疗带来很大困难 。 三、细菌的基因转移与重组 3、转导（transduction） 三、细菌的基因转移与重组 以温和噬菌体为媒介，将供体菌 DNA片段（染色体DNA、非接合性 质粒DNA）转移到受体菌内，通过 基因重组而使受体菌获得新的 遗传性状。 三、细菌的基因转移与重组 （1）转导的概念 三、细菌的基因转移与重组 温和噬菌体（temperate phage）：感染宿主菌后，不立即增殖，而是将其核酸整合到宿主菌染色体基因组中，与宿主菌DNA一起复制，并随细菌的分裂而传至子代细菌。 前噬菌体 溶原性细菌 溶原性细菌能正常以二分裂方式繁殖，前噬菌体也一代一代传下去。但有时也会自发终止（发生率10-5），从染色体上脱落，进入溶菌周期。 三、细菌的基因转移与重组 转导的机制 前噬菌体从染色体上脱离进行增殖，装配成新的子代噬菌体。大约在105～107次装配中发生一次错误，误将大小合适的供体菌DNA片段装入噬菌体头部，成为“假噬菌体”。 三、细菌的基因转移与重组 假噬菌体 供体菌 当“假噬菌体”（转导噬菌体）再度感染受体菌时，将供体菌DNA带入受体菌内。 完全转导与流产转导 普遍性转导、局限性转导 三、细菌的基因转移与重组 假噬菌体 受体菌 供体菌DNA 普遍性转导：因被包装的DNA可以是供体菌染色体上的任何部分，故称为普遍性转导 三、细菌的基因转移与重组 普遍性转导的结局 完全转导 外源性DNA片段与受体菌的染色体整合，并随染色体而传代，称完全转导 流产转导 外源性DNA片段游离在胞质中,既不能与受体菌染色体整合，也不能自身复制，称为流产转导 三、细菌的基因转移与重组 局限性转导 gal bio gal bio ga