不同激素浓度配比对红掌组织培养的影响研究小论文.docVIP

综合性（设计性）实验 实验报告 实验名称：不同激素浓度配比对红掌组织培养的影响研究 姓 名： 指导教师： 专 业： 生物科学 实验班级： 实验时间： 实验地点： 实验室 成 绩: 不同激素浓度配比对红掌组织培养的影响研究 一、 实验目的 ?学会正确选择、采集和处理外植体 能够根据H的设计合理的培养基配方 学会MS培养基的制备方法 学会红掌接种、转瓶等无菌操作技术 二、 实验原理 组织培养红掌又称安祖花、花烛、灯台花、火鹤、红鹤芋等。属多年生草本花 卉是天南星科，原产哥伦比亚。红掌株商30 40cm茎极短，叶自根茎抽出，长柄， 心形。色鲜绿。纸质，叶脉凹陷，单生顶花，花梗长约50cm,佛焰苞，广心形，色 鲜红，肉穗花序圆柱状，黄色。别致的叶形加Z火红挺直的佛焰苞，犹如精美灯台 上燃着的蜡烛，高雅刚致，气势非凡；而供切花观赏则彖征着：“热情、热心与热血” “高做潇洒、充满希望”。为此.红掌已成为当前国际上流行的名贵切花材料与盆栽 品种，应广为栽培，但它的分株方式繁殖，速度慢且成活率低。很难满足市场需求?所 以我们以叶片、叶柄为外植体进行了组织培养快速繁殖，材料的来源广，不伤害植 株，可在短期内向市场提供大量的优质商品苗。 三、 实验材料、仪器与试剂 材料：红掌 红掌，别名花烛、火鹤花、安祖花，是犬南星科花烛属多年生附生性常绿草本 花卉。其花形美，花期长，色泽鲜艳，造型奇特，应用范围广，经济价值髙，是忖 前全球发展快、需求量较大的高档热带切花和盆栽花卉。由于红掌的种子繁荊时间 较长，人工授粉较难；分株繁殖的繁殖系数又低，远远不能满足市场的需要。因此, 采用组培快繁技术成为一种有效的繁殖手段，能在较短时间内获得人量的优质种苗, 服务于生产 ?仪器设备： 超净T作台、灭菌锅、弯头剪、枪状蹑子、烧杯、培养皿、解剖刀、培养箱 3.试剂： MS大量元索、微量元索、肌醇、有机成分、铁盐、INNaOH和HC1、琼脂、蔗糖、植 物调节剂、70%乙醇、10%次氯酸钠 四、实验方法与步骤 (-)红掌愈伤组织诱导 1 ?配方设计 NO 6-BA 2,4-D NAA CK 0 0 1 1.0 0 2 1.0 0.1 3 1.0 0.1 0.2 4 1.2 0.1 1/2MS培养基的配制 溶化琼脂：取3L蒸馆水、加5X4. 8g琼脂粉，煮2-3min 取各种母液：大量元素5X25ml/l,微量元素5Xlml/l,有机成分5Xlml/l, 铁盐 5X5ml/l,肌醇 5X10ml/l 加入蔗糖:5X30g/l溶解 定容：加蒸粥水至3L 调节PH至5. 8：用PH试纸进行测定,再用INNaOH和HC1进行调节 分装：将基本培养基平分到5个100ml烧杯中 根据实验设计，添加生长调节剂，搅拌均匀 用具清理及洗涤 灭菌:高压灭菌,压力0. 12MPa,温度121-125°C,时间15min .外植体选择与处理 从健壮无病的植株上选取新抽生的刚展叶两周的叶片为外植体 将叶片清洗干净后，用75%乙醇浸泡约30s,无菌水漂洗1次，然斤用10%次氯酸钠 灭菌13min,无菌水充分漂洗5次，将红掌叶片切成0. 5cm见方的小块，最好帯叶 脉，用无菌滤纸吸干表面水分待用 4.接种：在无菌条件下将无菌叶背向下接种到盛有培养基的三角瓶屮 5?培养：一般前几天适当遮光，以后转入正常培养。培养条件要求光强1000-15001X, 光照时间8-10小时每天，温度保持在25°C左右 NO 6-BA 2,4-D NAA 接种数 愈伤总数 愈伤率 生长情况 CK 0 0 0 13 8 61.5% 良好 1 1.0 0.1 16 5 31.25% 一般 2 1.0 0.2 16 10 62.5% 良好 3 1.0 0.1 18 13 72.2% 良好 4 1.2 0.1 18 17 94.4% 良好 6.实验记录与结果 由上表可知，配方为1/2MS+1. 2 6-BA+0. 1 2, 4-D是诱导红掌愈伤组织的最佳培 养基配方，培养45天左右就可诱导出愈伤组织 (-)红掌不定芽诱导 1?红掌不定芽诱导配方设计 NO 6-BA NAA CK 0 0 1 1.0 1 O O O 6 7 0 2 1.2 0.5 0.7 0.9 1.0 3 1.4 0.5 0.7 0.9 1.0 4 1.5 0.5 0.7 0.9 1.0 MS培养基的配制 (1)溶化琼脂：取700mL蒸憾水、加4.8g琼脂粉,煮2-3min 取各种母液:大量元素50ml/l,微量元素lml/1,有机成分lml/1,铁盐5ml/l, 肌醇10ml/l 加入蔗糖:30g/l溶解 定容：加蒸馆水至1L 调节PH至5. 8：用PH试纸进行测定,再用INNaOH和HC1进行调节 分装:将基本培养基分装到50ml (20ml), 100ml (4