pcr扩增和电泳检测.pptVIP

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  • 2021-04-19 发布于浙江
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电 泳 观察 PCR反应 实验步骤 DNA在体内复制的条件是什么? 模板: 酶: 原料、能量: 解旋酶、DNA聚合酶等。 DNA分子的每条链 dATP、dGTP、dCTP、dTTP 引物: 温和的反应条件 DNA分子的结构 合成DNA分子的原料——脱氧核苷三磷酸 合成DNA分子的原料——脱氧核苷三磷酸 dATP dGTP dCTP dTTP 聚合反应机理: DNA聚合酶 不同细胞的细胞周期 不同生物细胞 需要的时间 细 菌 一般是20~30分钟 蚕豆根尖细胞 17.3小时 小鼠十二指肠细胞 15.3小时 人的肝细胞 22小时 人的宫颈癌细胞 22.5小时 PCR技术可在几小时内, 将特定核酸序列扩增百万倍! PCR的概念 PCR ( Polymerase Chain Reaction,聚合酶链反应)是指在体外,通过特异DNA引物扩增核酸分子中某个特定区域的技术。 PCR的反应体系 DNA模板 原料: dNTP(dATP、dGTP、dCTP、TTP) ; 酶: Taq聚合酶(嗜热细菌中分离得到) 引物:(单链DNA片段) Mg2+(维持酶活性所必需) PCR缓冲液:维持pH,保护Taq酶 PCR技术原理 变 性 退火 延伸 PCR三步曲 预变性 保温 变 性 90~95℃ 延伸 70~75℃ 退火

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