曲师大酶工程课件.pptVIP

第二章 酶的生物合成与发酵生产;第二章 酶的生物合成与发酵生产;第二章 酶的生物合成与发酵生产;第一节 酶生物合成及调节;一、酶的生物合成;二、酶生物合成的调节; 调节基因 启动基因 操纵基因 结构基因 DNA 转录 （-） RNA聚合酶 （+） 转录 翻译 mRNA 翻译 阻遏蛋白 蛋白质 诱导剂 ; ;;;;调节基因;; 色氨酸操纵子——酶的阻遏 ;酶的诱导和阻遏操纵子模型;调控方式;3.分解代谢物阻遏;;分解代谢物阻遏;三、提高酶产量的策略 （一）菌种选育（一劳永逸） 1.诱变育种 (1) 使诱导型变为组成型——选育组成型突变株 (2)使阻遏型变为去阻遏型 选育营养缺陷型突变株 解除反馈阻遏 选育结构类似物抗性突变株 解除分解代谢物阻遏——选育抗分解代谢阻遏突变株 2. 基因工程育种 ;（二）条件控制 1. 添加诱导物 酶的底物类似物最有效。 2. 降低阻遏物浓度 除去终产物 产物阻遏 添加阻止产物形成的抑制剂 避免使用葡萄糖 分解代谢物阻遏 避免培养基过于丰富 添加一定量的cAMP; 3.添加表面活性剂 离子型 对细胞有毒害作用 表面活性剂 Tween－80 非离子型 增加细胞通透性 TritonX－100 4. 添加产酶促进剂 ;第二节 细胞的选择;一、微生物;; 黑曲霉（Aspergillus niger) 米曲霉 (Aspergillus orzae) 青霉菌 (Penicillium) 霉菌 木霉 (Trichoderma) 根霉 (Rhizopus) 毛霉 (Mucor) 红曲霉 (Monascus); 产酶微生物的分离和筛选 1)样品的采集:从富含该酶作用底物的场所采集样品 2)富集培养: 投其所好，取其所抗 3)分离获得微生物的纯培养（pure culture）。 4)初筛：选出产酶菌种，以多为主。 5)复筛：选出产酶水平相对较高的菌株，以质为主。 ; ?-淀粉酶的筛选 ;蛋白酶产生菌的获得方法;产酶微生物优良菌种的选育 诱变育种 原生质体融合育种 基因工程育种 ;二、植物细胞;;二、 培养基的配制;二、微生物培养基;三、植物细胞;2.几种常见培养基;3.植物细胞培养基配制;四、动物细胞培养基;（二）动物细胞培养基的