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- 2021-04-19 发布于四川
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猪甘露聚糖结合凝集素A血清含量的测定
甘露聚糖结合凝集素(mannan-binding lectin,MBL),又称为甘露聚糖/甘露糖结合蛋白(mannan/mannose-binding protein,MBP),是一类能专一识别糖基并与之非共价可逆结合的非酶非抗体类蛋白质.目前已明确MBL由肝脏细胞合成后分泌入血循环中,通过识别与结合病原微生物表面的甘露糖,在机体天然免疫系统中发挥重要作用,是机体抵御病原体感染的第一道防线.1996年,研究人员首次从猪血清中分离、纯化出MBL,并且对猪MBL的生物学特征进行了鉴定.B N Lillie等人也首次提出了pMBL-A具有结和菌体的能力,这也是非人类MBL与细菌结合的第一个证据.本研究拟对猪血清中MBL-A的浓度进行检测,为抗病育种工作提供基础研究材料.
1材料与方法
1.1材料
仔猪血清:常规采血,制备血清.
抗猪MBL-A多克隆抗体:采用常规免疫程序制备.
1.2方法
1.2.1猪血清的制备
取已灭菌带有8号针头的2 mL注射器,在仔猪的耳静脉处采血液2 mL,水浴30 min后,5000 rpm离心20 min,吸出血清,编号,-20℃贮存备用.
1.2.2兔源抗pMBL-A多克隆抗体的制备
兔免疫前采血,分离血清作为阴性对照.取40 μg纯化的pM
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