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专题2 细胞工程专题2 细胞工程一、概念 细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过细胞水平或细胞器水平上的操作,按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。植物细胞工程按操作对象分动物细胞工程原理和方法研究的水平研究的目的概念植物细胞工程动物细胞工程按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品分类细胞工程细胞水平或细胞器水平细胞生物学和分子生物学细胞工程与基因工程相比:前者是细胞水平或细胞器水平上生物技术,后者是分子水平上的生物技术。2.1 植物细胞工程植物细胞工程技术常用的技术手段:植物组织培养植物体细胞杂交植物细胞工程理论基础:植物细胞的全能性植物细胞全能性和细胞膜的流动性2.1植物细胞工程植物细胞工程的基本技术植物组织培养思考探究:1、为什么植物的一个花瓣就可以培育出完整的植株呢?植物细胞具有全能性。2、什么是细胞的全能性?二植物细胞工程的基本技术(2)(1)植物细胞>动物细胞 (一)细胞的全能性1、概念:2、原因:具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞都具有发育成完整生物的潜能。细胞内含有发育成完整个体的全部基因分化程度越低全能性越高3、全能性的大小:4、体现条件:(1)离体状态(2)营养物质、激素等适宜的培养条件 体细胞>生殖细胞受精卵>541326植物组织培养再分化(愈伤组织)脱分化三植物组织培养技术(重点 理解 )条件也叫:外植体如:茎尖、根尖1、概念: 在无菌和人工控制条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株。2、原理:3、过程: 适宜的温度、PH值、养料、激素、充足氧气植物细胞具有全能性制备外植体脱分化愈伤组织无菌接种遮光试管苗(胚状体)移栽光照再分化正常植株应该掌握的几个概念: 1愈伤组织:一种高度液泡化、无定形状态的薄壁细胞组成的排列疏松无规则的组织。 具分裂、分化能力,既具全能性。无叶绿体,不进行光合作用植物细胞的脱分化:让已经分化的细胞,经过诱导失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程,又称去分化。脱分化的实质和结果分别是什么?实质是恢复细胞全能性的过程。结果是形成愈伤组织。植物细胞的再分化:脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化成根或芽等器官的过程。合作学习(1)在组织培养实验中,为什么要强调所用器械的灭菌和实验人员的无菌操作? 防止杂菌污染,因为杂菌生长快,会和培养物争夺营养。杂菌生长过程中会产生有害的物质,导致培养物迅速死亡。高压灭菌锅对培养基、试管、解剖刀等材料用具灭菌操作医用酒精对外植体消毒处理(2)在本实验中,切取胡萝卜块根时强调要切取含有形成层部分,原因是这部分容易诱导形成愈伤组织。请思考一下,胡萝卜的其他部分(如茎、叶、花),是否也能培养成小植株,你能用实验的方法进行验证吗?胡萝卜的其他部分(如茎、叶、花)也能培养再生形成小植株,只是诱导愈伤组织比较困难。依据学过的知识和实验过程思考回答:1、离体的器官、组织或细胞,如果不进行脱分化处理能否培养成完整的植物体?不能,因为细胞已经分化,失去了分裂能力。不进行脱分化处理就不能形成愈伤组织2、决定植物脱分化、再分化的关键因素是什么?植物激素的种类和比例大于1----促进根形成生长素:细胞分裂素的比例小于1-----促进芽的形成等于1-----愈伤组织不分化 3、为什么诱导愈伤组织的过程中应避光培养?在有光时,往往容易形成维管组织,而不易形成愈伤组织。(但再分化时需要光,光能使细胞内形成叶绿体、叶绿素,进行光合作用)愈伤组织根、芽植物体小结:植物组织培养的过程①适宜温度、遮光、 pH和无菌环境。②无机物、有机物和植物激素(生长素,细胞分裂素等)(离体的,已分化组织或细胞)外植体脱分化条件?特点?(未分化)无定形状态薄壁细胞高度液泡化排列疏松、无规则无叶绿体,不进行光合作用再分化(分化)二、植物体细胞杂交技术:这幅番茄—马铃薯图利用传统有性杂交方法能实现吗?为什么?因为不同种生物之间存在着生殖隔离,所以用传统的有性杂交方法是不可能做到这一点的。“Potamato”于是,这些科学家试图用这两种植物的体细胞进行杂交,来实现这一美妙的设想。请思考:1.你认为两个来自不同植物的体细胞完成融合,遇到的第一个障碍是什么?2.有没有一种温和的去壁方法呢?3.为什么两个原生质体能发生融合,这与细胞膜的什么特性有关?4.如何将杂种细胞培育成杂种植株?植物体细胞杂交不同种(1)概念:将 的植物体细胞,在一定条件下融合成 ,并把杂种细胞培育成 的技术。杂种细胞新的植物体(2)操作流程(3)流程分析①过程a为去除 获得具有活力的 ,用到的酶是 。②过程b是 ,其原理是 。③诱导b融合的两种方法:物理法包括离心、振动、电激
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