学习课件CFSE细胞增殖检测方法.pdfVIP

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CFSE 细胞增殖检测试剂盒 产品组成: 产品编号 BB-4211-1 BB-4211-2 组份编号 规格 500-5000 assays 1000-10000 assays 试剂 A:CFSE 荧光探针 1 瓶 2 瓶 42110A 试剂 B:CFSE 溶解液 1ml 1ml*2 42110B 试剂 C:CFSE 细胞标记液 10X 50ml 100ml 42110C 注意: CFSE须-20℃避光保存,注意防潮。 储存条件: -20℃避光保存。 有效期: 六个月。 注意事项: ● 本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。 ● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管 底,避免开盖时试剂损失。 ● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。 ● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。 ● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清 洗并彻底清除残留清洁剂。 ● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。 ● 需长时间保存可-20℃避光保存。 ● CFSE 标记细胞仅需 5-15分钟即可完成。对于不同细胞,最佳标记时间需自行摸索。 正式实验前,建议先做几个孔摸索染色浓度和加入 CFSE 试剂后的培养时间。 ● 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。 产品简介: 荧光染料 CFSE(CFDA-SE) ,是一种可对活细胞进行荧光标记的新型染料,可以标记活 体细胞。CFSE 是一种带有琥珀酰亚胺(NHS)的荧光染料,可以结合细胞内的蛋白质。CFSE 在结构上将酚羟基部位改造成 AM 体,所以自身不发荧光,荧光背景低,脂溶性高,能够 轻易穿透细胞膜,在活细胞内与胞内蛋白共价结合,进入细胞内的 CFSE 的AM 部位能被细 胞内酯酶水解发出绿色荧光。CFSE 的琥珀酰亚胺(NHS)和细胞内蛋白质的氨基部位结合, 固定在细胞内,不会漏出细胞外。CFSE 进入细胞后定位于细胞膜、细胞质和细胞核,在细 胞核的荧光最强。 在细胞分裂增殖过程中,CFSE 的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减,标记荧光可 平均分配至两个子代细胞中,因此其荧光强度是亲代细胞的一半,根据这一特性,它可被用 于检测细胞增殖,细胞周期的估算及细胞分裂等方面。CFSE 标记细胞的荧光非常均一,优 于以前使用的其他细胞示踪荧光探针如 PKH26 ,并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均 一。在细胞分裂增殖过程中,CFSE 标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,荧光强度变为 亲代细胞的一半,通过流式细胞仪(FL1 通道)根据荧光强度的不同,可检测出未分裂细胞, 分裂一次(1/2 的荧光强度),二次(1/4 的荧光强度),三次(1/8 的荧光强度),以及更多 分裂次数的细胞。CFSE 可检测分裂次数多达八次甚至更多。经 CFSE 标记的细胞可用于体 外和体内增殖研究,且具

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