病理学试验技术论文.docxVIP

病理学试验技术论文 皮肤组织病理学检查 【关键词】皮肤;病理学;标本制备 皮肤是人体的一个重要器官，由赵辨教授主编的新版《中国临床皮肤病学》收集了1700多种皮肤病。皮疹是皮肤病的主要表现，临床变化多种多样，有的缺乏特异性，有些不同的皮肤病临床皮疹类似，需要借助皮肤组织病理学检查等技术才能做出诊断。由于皮肤组织位于人体表面，取材较容易，可对处于不同阶段的皮疹进行病理检查，是皮肤科高年资临床医生必需掌握的临床辅助诊断方法。 皮肤病理检查简称活检是通过环钻或小手术取下一小部分病灶皮肤，经过固定、染色等技术在显微镜下或电脑上观察其变化的诊断技术。 适应证 活检的目的在于确定诊断和了解病情，因此，对任何临床上诊断不明的皮肤病都可以进行皮肤活检，根据其诊断价值的不同可分为以下几类。1 有高度诊断价值者，如基底细胞癌、鳞状细胞癌、痣等良恶性肿瘤、病毒性皮肤病如传染性软疣、角化性皮肤病如毛囊角化病、汗管角化病等。 2 有诊断价值者，如疱疹类皮肤病天疱疮、家族性慢性良性天疱疮等、代谢性皮肤病原发性皮肤淀粉样变性、腔前黏液性水肿等、某些肉芽肿性皮肤病环状肉芽肿、结节病等、有一定特征的炎性疾病如扁平苔藓、结核、麻风、深部真菌等。 3 早期发现病损的不良转化或癌前病变。 4 提示做进一步的其他检查或与全身其他疾病的关系。 5 疑难少见病例，通过皮肤病理及其他检查寻找诊断线索。 6 对有些不具特征性组织像的皮肤病虽然不能直接诊断，但仍具有参考或除外其他疾病的价值。 综上所述，皮肤活检的适应证较广，不过应尽量做到有的放矢，而切忌任意采取标本，造成患者不必要的痛苦。 皮疹活检标本的选择 在选择皮肤活检标本时应注意以下原则。 1 选择发育成熟的损害，因为早期皮疹常为非特异性，而晚期皮疹大多处于恢复或变性、坏死阶段。 2 选择早期皮疹，适用于疱疹性皮肤病以及含有病原微生物的皮疹，最好在损害出现24～48小时以内取材。 3 对于环状皮疹应选择活动边缘部分，如切取中央不活动的部分，病变可能已趋向于消退而找不到典型病变。 4 切取标本时应常规包括皮下组织，因不少皮肤病的典型病变在皮下组织。有些特殊疾病如皮肌炎等还要切到肌肉。 5 取材时应包括一小部分正常组织，以便与病变组织对照。 6 应尽量避免在腋窝、腹股沟、面部显眼处或关节活动部位等处取材。 获取皮肤标本的方法 1 手术切除 最常用，可根据需要切取大小不同的皮肤标本，深及皮下组织，对疱疹特别是皮下结节、囊肿和肿瘤尤为适合。注意事项：1切刀须锐利，切除的组织上下等大;2切口方向与皮纹一致，两端对齐;3避免夹压组织，尽量夹持切下组织的两端，切忌夹持中央部分。 2 环钻 简便易行，适用于小损害，或病变只限于表皮和真皮，或手术切除有困难的病例。 3 削切 只能切取表皮浅层，一般很少采用。 活检标本的切片制作 皮肤切片的制作过程同其他病理组织，操作步骤如下：标本-固定-脱钙-水洗-硬化-脱水-透明-包埋-切片。皮肤组织结构不同于其他器官，分层明显，因而欲制成高质量的皮肤切片，应注意以下几点：1脱水最好保持在一定温度52～54℃下进行，脱水应完全，依次在70%、80%、95%酒精中各脱水2小时，最后在无水酒精中Ⅰ和Ⅱ各脱水1.5小时;2透明时间视皮肤组织块的大小和厚薄而定，一般经二甲苯Ⅰ和Ⅱ各2～3分钟;3石蜡包埋浸蜡时，保温箱内温度一般调节在52～56℃溶蜡，温度过高可使组织发生变质。 切片染色 1 苏木素-伊红染色法简称HE 常规病理染色方法，染色过程中应注意：1皮肤石蜡包埋切片的脱蜡应完全，冬季可预先放在56℃温箱内2小时，使切片上剩余的石蜡溶解;2切片于二甲苯Ⅰ和Ⅱ内浸泡应各达15～20分钟;3切片经苏木素染色后，在染伊红前，经1%酸性酒精处理2～3秒，流水冲洗至少20～30分钟。 2 特殊染色法 对某些皮肤病的诊断和鉴别诊断有一定帮助。常用的一些特殊染色方法、目的和结果见表1。 3 免疫组织化学染色 HE染色切片，有时很难区分其组织来源，而确定组织来源对诊断具有重要价值，这时需免疫组织化学染色来帮助诊断。常用免疫组织化学染色见表2。 切片观察 传统的切片观察是通过显微镜下进行，根据需要有普通光学、偏振光、荧光显微镜等，随着科学的发展，通过切片扫描技术，可直接在电脑上进行读片诊断。 诊断思维 1 整体观，不能只从局部或片段来看问题，先低倍扫视分析病变的结构模式，对每一个活检病例应了解其全貌，如有必要还应该对各个阶段的皮疹作相应的病理检查。