最全面检定菌保存传代使用销毁标准操作规程.docx

检定菌生存、传代、利用、烧毁尺度操纵规程1．目得：尺度药品微生物学检定用菌得治理，最大限度低落变异率，确保菌种得溯源性与稳固 检定菌生存、传代、利用、烧毁尺度操纵规程 1．目得： 尺度药品微生物学检定用菌得治理，最大限度低落变异率，确保菌种 得溯源性与稳固性，从而确保微生物学查验效果得正确可靠； 2．依据： ChP2021版（一部）、?中国药品查验尺度操纵尺度? （ 2021 年版）； 3．范畴： 本规程实用于检定用菌种得治理，包罗菌种得申购、生存、传代、使 用及烧毁等； 4．责任： 4.1.QC 主管卖力菌种得申购、担当、生存、分发； 4.2. 微生物查验员卖力菌种确实认、传代、利用及烧毁； 5. 相干文件及术语： 5.1 ．术语 尺度菌种为指由中国药品生物成品检定所医学微生物菌种收藏治理中 心提供得冷冻枯燥菌； 传代用菌种为指用尺度菌种制备得接纳特定生存要领恒久牢固生存得 菌种，用于传代及制备事情用菌种； 事情用菌种为指用尺度菌种或传代用菌种接种至平凡琼脂斜面造就 后，作为平常事情利用得菌种； 菌种得代为指将其接种至一奇怪造就基上或造就基内，每萌发一次即 称为一代，从菌种收藏中央得到得冷冻枯燥菌种为第 0 代； 6. 尺度： 第 1 页，共 17 页 6.1 ．检定菌得申购QC主管每年凭据检定菌种得利用环境（包罗暂时查验必要） ，提出购置方案，交由质量治理部部长审批后，向中检所菌种收藏中央或省（市）药 6.1 ．检定菌得申购 QC主管每年凭据检定菌种得利用环境 （包罗暂时查验必要） ，提出购置 方案，交由质量治理部部长审批后，向中检所菌种收藏中央或省（市）药 检所购置冻干菌种（尺度菌种） ；也可以直接向省（市）药检所购置传代用 菌种，购置时，需扣问与确定菌种得代数，以便传代时控制代数； 6.2 ．检定菌得吸收 菌种到达实行室后，由 QC主管吸收菌种，查抄其名称与数目，以及每 一支得完备性，同时将菌种得全部信息，填写在?检定菌吸收记载? （附表 1）上，内容包罗：名称、数目、编号（无编号者按检定菌种得编号原就编 号）、代数、去源、吸收日期、吸收人等，并将其暂贮存于 4～ 8℃冰箱中， 在一周内必须完成转种； 6.3 ．检定菌得生存 6.3.1 ．事情用菌种得生存 事情用菌种接纳斜面低温生存法； 将菌种接种在适宜得固体斜面造就基上，待菌生长充实以后，转移至 4～ 8℃冰箱中生存；此法仅用于事情用菌种得短期生存，并应随时查抄其 污染杂菌与变异等环境，发明非常环境，经应灭活处置后烧毁； 生存时间凭据菌种种类而差别，细菌： 1 个月；酵母菌： 2 个月；霉菌 及芽胞： 3 个月； 6.3.2 ．传代用菌种得生存 接纳甘油冷冻管收藏法或液体石蜡生存法； 6.3.2.1 ．甘油冷冻管生存法 第 2 页，共 17 页 用无菌接种环轻轻刮取经冷冻复溶增菌后并接种至平板或琼脂斜面得菌苔，并通过接种环与试管壁之间得轻轻摩擦而使细菌充实扩散到预先装入试管中得无菌纯化水中，调解菌液浓度，使其等同于10 号比浊管，向已制备好得菌悬液中参加等体积得无菌甘油（浓度20%），即为10%甘油菌悬液，轻轻振摇，使内容物充实混淆，分装于无菌小试管，在-30 用无菌接种环轻轻刮取经冷冻复溶增菌后并接种至平板或琼脂斜面得 菌苔，并通过接种环与试管壁之间得轻轻摩擦而使细菌充实扩散到预先装 入试管中得无菌纯化水中，调解菌液浓度，使其等同于 10 号比浊管，向已 制备好得菌悬液中参加等体积得无菌甘油（浓度 20%），即为 10%甘油菌悬 液，轻轻振摇，使内容物充实混淆，分装于无菌小试管，在 -30 ℃冷冻条件 下生存；此甘油冷冻管为第 2 代（ G2）；可以每隔 2 年转种一代；利用时， 取出一支放至室温，转种增菌造就或接种至琼脂斜面苏醒，挑取纯菌落传 代或事情用； 此种要领重要实用于需氧细菌与酵母菌得收藏（如大肠埃希菌、金黄 色葡萄球菌、乙型副伤寒沙门菌） ； 6.3.2.2 ．液体石蜡生存法 6.3.2.2.1 ．无菌液体石蜡得制备：选用优质化学纯液体石蜡，将液体 石蜡分装加塞，用牛皮纸包好，在 121℃灭菌 30 分钟, 置 40℃恒温箱中蒸 发水分，经无菌查抄后备用； 6.3.2.2.2 ．液体石蜡管得制备：将菌种穿刺接种于半固体高层造就基 中，在适宜条件下造就竣事后，在层流台下用无菌吸管汲取上述无菌液体 石蜡至造就好得菌种管内，并使石蜡超过菌种外表约 1cm 使菌体与氛围隔 绝，并将试管竖立，置于 -20 ℃冷冻或 2～8℃冰箱中生存； 此法重要实用于霉菌、厌氧菌、放线菌、芽孢杆菌得生存（如枯草芽 孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉菌等） ； 6.3.3 ．各菌种得生存要领、条件及限期，见?传代用菌种生存要领、 生存温度、生存限期? （附件 1）； 第 3 页，共 17