选择性必修3 第10单元 第38课　基因工程 讲义（考点+典例+检测） 2022届高考生物一轮复习（新教材人教版2019）.docVIP

PAGE 1/ NUMPAGES 3 第38课　基 因 工 程 课程标准要求 学业质量水平 5.1.1　概述基因工程是在遗传学、微生物学、生物化学和分子生物学等学科基础上发展而来的 5.1.2　阐明DNA重组技术的实现需要利用限制性内切核酸酶、DNA 连接酶和载体三种基本工具 5.1.3　阐明基因工程的基本操作程序主要包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因导入受体细胞和目的基因及其表达产物的检测鉴定等步骤 5.1.4　举例说明基因工程在农牧、食品及医药等行业的广泛应用改善了人类的生活品质 5.2.1　概述人们根据基因工程原理，进行蛋白质设计和改造，可以获得性状和功能更符合人类需求的蛋白质 5.2.2　举例说明依据人类需要对原有蛋白质结构进行基因改造、生产目标蛋白的过程 1.结合生活或生产实例，举例说出基因工程的基本原理。(生命观念) 2.运用比较、归纳与概括的方法，理解限制酶和DNA连接酶的作用特点，运用结构与功能观，理解载体的结构特点及作用。(生命观念　科学思维) 3.按照实验操作步骤，进行DNA的粗提取与鉴定实验，写出实验报告并与他人进行必要的交流。(科学思维　科学探究) 4.运用演绎与推理、模型与建模，理解基因工程基本操作程序，进行简单的设计。(生命观念　科学思维) 5.按照实验操作步骤，利用聚合酶链式反应(PCR)扩增DNA片段并完成电泳鉴定，或运用软件进行虚拟PCR实验。(科学思维　科学探究) 6.结合生活或生产实例，举例说出基因工程的应用和蛋白质工程的基本原理，尝试提出初步的蛋白质工程学构想，进行简单的设计。(生命观念　科学思维) 一、基因工程(重组DNA技术)的概念 1．操作技术：转基因等技术。 2．操作水平：DNA分子水平。 3．操作结果：赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 二、重组DNA技术的基本工具 1．限制性内切核酸酶(限制酶)——“分子手术刀” (1)来源：主要是原核生物。 (2)作用特点： 具有专一性，表现在两个方面： ①识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列。 ②使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。 (3)作用结果：产生黏性末端或平末端。 2．DNA连接酶——“分子缝合针” (1)作用： 将切下来的DNA片段拼接成新的DNA分子。 (2)种类 常用类型 E.coli DNA连接酶 T4 DNA连接酶 来源 大肠杆菌 T4噬菌体 功能 只“缝合” 黏性末端 “缝合”黏性末端和平末端 结果 恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，如图： 3.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” (1)作用：将外源基因送入受体细胞。 (2)常用载体：质粒、噬菌体、动植物病毒。 (3)最常用载体：质粒。 ①本质：裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有自我复制能力的环状双链DNA分子。 ②特点eq \b\lc\{(\a\vs4\al\co1(能自我复制，或整合到受体DNA上同步复制,有一个至多个限制酶切割位点，便于限制,酶识别切割,有特殊的标记基因，便于重组DNA分子的筛选)) 三、DNA的粗提取与鉴定 1．原理 (1)提取 ①依据DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精，初步分离DNA和蛋白质。 ②DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，也能溶于2 mol/L的NaCl溶液。 (2)鉴定：DNA＋二苯胺eq \o(―――→,\s\up10(沸水浴))蓝色。 2．操作流程 四、基因工程的基本操作程序 1．第一步：目的基因的筛选与获取 (1)目的基因：用于改变受体细胞性状或获得预期表达产物等的基因，主要是指编码蛋白质的基因。 (2)筛选合适的目的基因：从相关的已知结构和功能清晰的基因中进行筛选。 (3)利用PCR获取和扩增目的基因 ①PCR：聚合酶链式反应。 ②原理：DNA半保留复制。 ③反应场所：PCR扩增仪。 ④条件eq \b\lc\{(\a\vs4\al\co1(模板：目的基因所在的DNA片段,酶：耐高温的DNA聚合酶,2种引物：分别与单链相应序列相结合，使DNA,　　 　聚合酶能够从引物的3′端,　 　　开始连接脱氧核苷酸,原料：4种脱氧核苷酸,控制温度：使DNA复制在体外反复进行,)) ⑤过程 过程 说明 图解 变性 当温度上升到90 ℃以上时，双链DNA解聚为单链 复性 当温度下降到50 ℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合 延伸 当温度上升到72 ℃左右时，耐高温的DNA聚合酶有最大活性，可使DNA新链由5′端向3′端延伸 ⑥结果：上述三步反应完成后，一个DNA分子就变成了两个DNA分子，随着重复次数的增多，DNA分子就以2n的形式增加。 2．第二步：基因表达载体的构建——基因工程的核心 (1)