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大蒜愈伤组织的诱导形成及培养 先将大蒜放在8℃的低温环境中贮藏1个月，以打破其休眠期，去保护叶后用无菌水冲洗蒜瓣，再在无菌条件下用70％乙醇漂洗15-30s，置于0.1%的升汞溶液中消毒8min，取出经无菌水冲洗三遍，将蒜瓣切成0.5×0.3×0.2cm3带表皮的25℃，光照强度6000lux，每天循环光照12h，过20天左右移植于盛有愈伤组织增殖培养基的三角瓶中，在相同条件下培养20天。如此重复移植培养4-5次。 学习文档 愈伤组织的诱导培养基以3％蔗糖为碳源，加0.8%琼脂，pH值为5.8。添加2ppm的2，4-二氯苯氧乙酸（植物细胞生长素）和0.1ppm的6-糖基氨基嘌呤（植物细胞分裂素）对诱导大蒜愈伤组织的形成有明显的促进作用。生长素能刺激细胞分裂，其作用机理是消除DNA复制进的抑制物，从基因水平上影响细胞分裂。 学习文档 增殖培养基与诱导培养基一样，只是新添加了0.02%的酪蛋白水解物。对愈伤细胞第5次增殖5次增殖培养的跟踪表明，在培养前期大蒜细胞生长旺盛，呼吸激烈，胞内合成与积累SOD的能力也随之加强。随着时间的推移，胞内SOD急骤增加，至15天时SOD的比活力达到天然大蒜的1.5倍。但细胞增殖速率的最大值是在对数生长末期（约培养20天）才出现，此时胞内SOD的积累也达到高峰期。 学习文档 大蒜细胞的悬浮培养和深层发酵