动物生理学实验课件（二） 蛙类坐骨神经-腓肠肌标本的制备.pptVIP

实验二 蛙类坐骨神经-腓肠肌标本 的制备 课件制作 吴洪流 实验二 蛙类坐骨神经-腓肠肌标本的制备 一.实验目的 练习并掌握具有正常兴奋收缩功能的蛙类（或蟾蜍）坐骨神经---腓肠肌标本的制备方法。 二.实验原理 蛙类的某些基本生命活动和生理功能与哺乳类动物有相似之处。离体蛙类坐骨神经--腓肠肌标本的一些基本生命活动和生理功能反映了脊椎动物的神经肌肉的一般规律。尤其是标本易制备，其生理活动易观察，且存活较长时间。而且在离体组织的生活条件比较简单，易于控制和掌握，来源也较丰富，因此在生理学实验，尤其是细胞生理学的某些实验中，普遍应用蛙（或蟾蜍）的坐骨神经--腓肠肌标本来研究观察神经肌肉组织的兴奋性、兴奋传导过程、刺激与收缩的关系、以及运动终板的传递和肌肉收缩的机能等，坐骨神经-腓肠肌标本的制备是动物生理学实验最基本的操作技术。 实验二 蛙类坐骨神经-腓肠肌标本的制备 三.实验材料与用具 青蛙（或蟾蜍）、手术剪刀1把、普通剪刀1把、镊子2把、玻璃分针2个、蛙板1块、培养皿1个、吸管1支、任氏液、探针、蛙钉、滴管、小烧杯、培养皿、锌铜弓、棉线团、生理试验多用仪1台、刺激用保护电极1根、普通电极1根、地线若干。 四.实验操作与观察 （一）坐骨神经腓肠肌标本制备 1.破坏脑脊髓:去蟾蜍一只,用自来水冲洗干净.左手握蛙,用食指下压头部前端(吻端)拇指按压背部,使头前俯.右手持探针由前端沿正中线向尾端触划,触到凹陷处即枕骨大孔所在部位,将探针由此垂直刺入枕骨大孔,再将针折向前方插入颅腔并左右搅动捣毁脑组织,然后将针退出至刺入点皮下.针尖倒向后方,通入脊椎管捣毁脊髓.待四肢肌肉松弛,呼吸消失,即表示脑和脊髓完全破坏,否则应按上法再进行捣毁. 实验二 蛙类坐骨神经-腓肠肌标本的制备 2.剥皮:?以两腋下为水平点,沿胸廓剪开一圈皮肤,然后左手捏住头部,右手捏住断端边缘皮肤,向下剥掉全部断端后皮肤. 3.剪除躯干上部及内脏:?在骶胳关节水平以上一厘米处用粗剪刀剪掉脊柱,将头、前肢和内脏一并弃去,保留后肢,腰背部脊柱及由它发生的坐骨神经.将标本放在盛有任氏液的烧杯内,将手及用过的器械洗净. 4.分离两腿:?沿正中线用剪刀将脊柱分为两半(勿损伤坐骨神经),并从耻骨联合中央剪开两侧大腿.分离后两腿浸于盛有任氏液的烧杯内. 5.制作坐骨神经腓肠肌标本:?取一腿放置蛙板中央的玻璃板上,腹侧向上用蛙钉固定之. （1）游离坐骨神经:?用玻璃分针沿脊柱侧游离坐骨神经,并于近脊柱处穿线结扎,再循坐骨神经沟(股二头肌与半膜肌之间的裂缝),找出坐骨神经大腿部,用玻璃分针小心剥离,然后从脊柱根部将坐骨神经剪断,手执结扎神经的线将神经轻轻提起,剪断坐骨神经所有分支,并将神经一直游离至腋窝为止. 实验二 蛙类坐骨神经-腓肠肌标本的制备 （2）完成坐骨神经小腿标本:?将游离干净的坐骨神经搭于腓肠肌上,在膝关节周围剪掉全部大腿肌肉并用粗剪刀将股骨刮干净,然后由股骨中部剪去上段股骨,保留的部分就是坐骨神经小腿标本。 （3）制成坐骨神经腓肠肌标本:?将上述坐骨神经小腿标本在跟腱处穿线结扎后剪断跟腱.游离腓肠肌至膝关节处,然后沿膝关节将小腿其余部分全部剪掉,这样就制得一个具有附着在股骨神经上的腓肠肌并带有支配腓肠肌的坐骨神经的标本,放入任氏液中静置10分钟备用. （4）检查标本的兴奋性：用经任氏液湿润的铜锌弓迅速接触坐骨神经，如腓肠肌发生明显的收缩，表明标本的兴奋性良好，即可将标本置于盛有干净任氏液的培养皿中待用。 （二）坐骨神经干标本制备 实验二 蛙类坐骨神经-腓肠肌标本的制备 分离坐骨神经的方法及步骤与上述1-5项的(1)项同.当坐骨神经游离至膝关节处后再向下继续剥离,在腓肠肌两侧肌沟内找到肌神经和腓神经,分别分离二支神经直至足趾,用线分别结扎(棉线留10厘米长,以便提拿标本),在结扎的远端剪断.注意胫腓二支在绕过膝关节时,其上覆有肌腱和筋膜,分别时慎勿剪断或损伤神经.标本置任氏液中浸泡10分钟备用. 五.实验应注意事项 1.本制备过程中尽可能避免损伤神经，不可用力牵拉或用金属器械钳夹神经。 2.随时滴加任氏液保持神经湿润，并将暂时不用的标本置于任氏液中备用。 实验二 蛙类坐骨神经-腓肠肌标本的制备步骤图解 实验二 制备完成的蛙坐骨神经-腓肠肌标本 实验二 蛙类坐骨神经-腓肠肌标本的制备 六.作业与思考 1.为什么制备过程中要避免用金属器械接触神经？ 2.兴奋是如何从神经传递到肌肉的？ 3.肌肉收缩是钙离子有什么作用？ 4.神经兴奋与肌肉收缩如何保证是一对一的关系？ 注明：本课件的完成引用了各院校的资料和图片，谨此一并致谢！ 附1：实验二 蛙类坐骨神经-腓肠肌标本的制备过程 附2：蛙坐骨神经——腓肠肌标本的制备图解