动物生理学实验课件（六） 鱼类红细胞计数.pptVIP

实验六 鱼类红细胞计数 课件制作 吴洪流 实验六 鱼类红细胞计数 一.实验目的 了解血细胞计数的原理并掌握显微红细胞计数的方法。 二.实验原理 用红细胞吸管吸取一定量的血液，以稀释液稀释一定的倍数，在将稀释的血液置于计数室中，显微镜下计算一定容积的稀释血中的红细胞数，然后通过公式计算,再将其换算成每升血液中的红细胞数。 实验六 鱼类红细胞计数 血液中血细胞的计算是使用血细胞计数板。而且要用适当的溶液稀释后，放入计数板的计数室内，在显微镜下计算一定容积血液稀释中的血细胞个数，再将所得结果换算为1mm3血液中的血细胞个数。 三.实验材料与用具 鲤鱼或罗非鱼、血细胞计数板、血红蛋白吸管、1ml和5ml吸管、表面皿、显微镜、刺血针、酒精棉球、红细胞稀释液、95%酒精、乙醚、1%氨水。 计数室高度：0.1mm面积：1mm2 血球计数板正面观 血球计数板侧面观 计数室低倍镜观察 实验六 鱼类红细胞计数 四.实验方法与步骤 1．采血及稀释 用5ml吸管吸取3.98ml红细胞稀释液放入表面皿内备用。 2. 吸血及血液的稀释：吸血及血液的稀释均在红细胞吸管中进行，所以在吸血前检查红细胞吸管是否清洁，若不清洁则按蒸馏水、乙醇、乙醚的顺序清洗。 3. 推片及充液：在推片和充液前，先在显微镜下检查计数板和盖玻片是否清洁，若不干净清洗后在进行推片。推片就是用手指将盖玻片固定在计数板的正中计数室部分的边缘，然后用大拇指将其缓缓地推行，使盖玻片贴在计数室俩侧地槽上。充液：将稀释好的血液摇均后，先弃去俩滴，然后用半滴放于计数室与盖玻片交界处，溶液侧可通过毛细吸管自动地渗入计数室内。 实验六 鱼类红细胞计数 4．计数：血液稀释液滴入计数室后，须静置2-3 min，然后在低倍镜下计数。计数红细胞时，数中央大方格的四个角的4个中方格和中央的一个中方格（共5个中方格）的红细胞总数。计数时应循一定的路径，对横跨刻度上的血细胞，依照“数上不数下，数左不数右”的原则进行计数。计数红细胞时，如中方格的红细胞数目相差20个以上，表示血细胞分布不均匀，必须把稀释液摇匀后重新计数。 5. 结果计算：红细胞总数（N）是经稀释液的血液在5个方格中的红细胞总数。换算方法是X=N×1010(稀释200倍时)或N×5×109(稀释100倍时 )。 红细胞数：将中央大方格中的5个中方格内数得红细胞总数乘以10,000，即得每mm3血内的红细胞总数，因为： 实验六 鱼类红细胞计数 （1）稀释液3.98加入血20 mm3（即0.02 ml），使血细胞稀释200倍，换算成未稀释血时应乘以200。 （2）在计数室内只计数0.02 mm3（即1个中方格的容积为0.2×0.2×0.1=0.004 mm3,5个中方格的容积为0.004×5=0.02 mm3）,换算成每mm3时应乘以50。 这样把5个中方格内数得的红细胞总数乘以10,000（即200×50=10,000）即得每mm3血内的红细胞总数。 五.实验应注意事项 1. 血红蛋白吸管使用前、后注意清洗干净。 实验六 鱼类红细胞计数 2.计数板放置载物台后保持水平。 3.务必先盖上盖玻片，再滴加血样。 六.作业与思考 1.在操作过程中，哪些因素可影响计数的准确性？ 2.为什么滴加样品后要静止一段时间？ 3.计算结果，报告中简要说明计算过程。求出本组同学测 定的均值并评价之。 注明：本课件的完成引用了各院校的资料和图片，谨此一并致谢！ * * * * *