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牡荆苷对MPTP诱导的帕金森病模型小鼠行为学、神经递质及脑黑质多巴胺能神经元凋亡的影响 帕金森病（parkinson’s disease，PD）是一种好发于中老年人群中的进行性神经系统疾病，主要临床表现为运动功能障碍、静息震颤、僵硬，且伴随抑郁、乏力、睡眠障碍，给患者身心健康造成极大影响PD致病因素较多，发病机制也极为复杂，而氧化应激在PD发病过程中扮演极为关键的作用牡荆苷是分布于金莲花、布渣、山楂、光果甘草等多种植物中的黄酮碳苷类化合物，具有保护心脑血管、抑制神经炎症、抑制骨溶解和抗肿瘤等多种药理学作用1 材料和方法1.1 实验动物32只SPF级雄性C57BL/6小鼠，体重22~24 g，2~3月龄，购于广西医科大学实验动物中心[SCXK（桂）2014-0002]。小鼠在广西国际壮医医院明秀分院实验动物房分笼饲养和取材[SYXK（桂）2019-0001]，允许自由饮水，普通饲料喂养，饲养温度为（20±2）℃，相对湿度36%，12 h昼夜节律。本次动物实验研究经广西国际壮医医院伦理委员会审批通过（GZL2020-019），并按实验动物使用的3R原则给予人道的关怀。1.2 主要试剂与仪器超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD，批号：A001-3-2）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）、谷胱甘肽-过氧化物酶（Glutathione peroxidase，GSH-Px，批号：A003-1-1）、5-羟色胺（5-HT，批号：H104）、DA（批号：H170）、神经元特异性烯醇化酶（neuron specific enolase，NSE，批号：H240）、原位末端标记（TdT- mediated dUTP nick and labeling，TUNEL，批号：G002-1-2）试剂盒均购自南京建成生物工程研究所；二羟基苯乙酸（dihydroxyphenylacetic acid，DOPAC，批号：kt21794）、高香草酸（Homovanillic acid，HVA，批号：kt21801）、胱抑素C（cystatin C，Cys-C，批号：kt30088）ELISA检测试剂盒购自武汉默沙克生物科技有限公司；B淋巴细胞瘤-2（B cell lymphoma-2，Bcl-2，批号：ab194583）、凋亡相关因子Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein，Bax，批号：ab182733）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Cysteine aspartic acid protease-3，Caspase-3，批号：ab184787）和β-肌动蛋白（β-actin，批号：ab6276)）单克隆抗体均购自英国Abcam公司；十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate．polyacrylamide gel electmphoresis，SDS，批号：P0670）凝胶配置试剂盒、二喹啉甲酸（Bicinchoninic acid，BCA）蛋白浓度测定试剂盒（批号：P0012S）和聚偏二氟乙烯膜（polyvinylidene fluoride，PVDF，批号：FFP24）均购自江苏碧云天生物公司。牡荆苷（HPLC≥95%，批号：11027-63-7）、1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine，MPTP，批号：5063820001）购于Sigma公司；美多芭片（批号：981969），上海罗氏制药有限公司生产。1.3 实验方法1.3.1 分组、造模及药物干预32只小鼠随机分为空白组、模型组、阳性药物（美多芭）组、牡荆苷组，每组8只。空白组注射生理盐水，其余各组均按30 mg/kg剂量腹腔注射MPTP（40 mg/mL），连续7 d。建模成功后，美多芭组灌胃1.67 mg/kg美多芭片，牡荆苷组灌胃20 mg/kg牡荆苷，空白组、模型组灌胃等量生理盐水，连续治疗30 d。1.3.2 行为学检测在造模前，造模后、治疗后分别对各组小鼠的以下行为学进行检测。每只小鼠测试之前每天训练3次，连续3 d。（1）爬杆实验制作一个直径为1 cm、长0.6 m的光滑不锈钢杆，在杆中央做一条标记线，将杆垂直固定于一水平平面，将小鼠头向下放置在杆的顶部，使其沿杆自然爬下，对小鼠下滑行为进行评分，爬杆实验评分标准：0分，四肢并用，一次顺利从杆上爬下；0.5分，一次性从杆上爬下，但后肢出现滑行；1分，上杆后停顿数次后爬下；1.5分，滑行后滑落，有轻微震颤；2分，震颤明显，四肢僵直，不能抓杆，直接掉落；2.5分，连续震颤，四肢麻痹