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一例奶牛出血性败血症的诊断体会 摘要：2020年11月，某奶牛养殖场从外地引进一批奶牛，在隔离饲养期间发现奶牛出现体温升高、精神沉郁、食欲减退等临床症状。随着病情的延长，病牛出现腹痛、腹泻等症状，部分病牛结膜发绀，且在发病后24 h左右死亡。根据发病牛的临床症状和解剖后的病理变化，并通过实验室病原分离与诊断，确定此次疫情是由牛巴氏杆菌所引起的牛出血性败血症。本文主要对该次疫情的诊治过程进行介绍，以期为后续类似疫病的诊断与防控提供参考。 0 引言牛出血性败血症，又称牛巴氏杆菌病，是由牛多杀性巴氏杆菌所引起的一种急性、热性传染病。多杀性巴氏杆菌是一种条件性致病菌，存在于健康动物体内，当外界刺激引起动物免疫能力下降时，引起动物发病。该细菌血清型众多，在毒力和流行病学等方面生物学特异性差异很大。牛多杀性巴氏杆菌感染无年龄和性别特异性，各个品种的牛均易感，但黄牛、水牛和奶牛更为易感。该病主要通过发病动物的分泌物、排泄物传播，发病一般无季节特异性，但冷热交替的潮湿多雨季节较为常见虽目前已经有成熟的商品化疫苗，但由于不合理的免疫规程及饲养管理，该病在我国主要畜牧养殖地区仍广泛流行。2020年11月底，某奶牛养殖场引进的奶牛突然发病，经兽医站专业工作人员诊断为牛巴氏杆菌病。由于诊断治疗及时，除了3头患病奶牛由于发病较急死亡外，其余均治疗痊愈，疫情得到了有效控制，以下将对此次疫病的诊治过程进行介绍。1 发病情况2020年11月，某奶牛养殖场从外地引进10头奶牛，在隔离饲养期间，奶牛突然出现精神沉郁、食欲不振的症状，随后腹泻拉稀。该病发病急、传染快，随后隔离饲养的奶牛均发病，且死亡3头。但由于此批次奶牛为隔离饲养，因此，同一养殖场内的其他牛群未发病。2 临床表现病牛发病初期体温升高，可达41～42℃，随后出现全身症状，精神沉郁，食欲和饮欲废绝，反刍活动停止。由于高热，病牛脉搏加快、鼻镜干燥、结膜潮红，呼吸心跳加快，病牛发病后期出现腹泻症状，病程较短，通常在腹泻后出现体温迅速下降，随后死亡。3 解剖变化对病死的奶牛进行剖检可发现全身性的病理变化，全身黏膜、浆膜、皮下、肺、肌肉存在散在的点状出血；心、肝、肾等实质器官变性；大小肠出现不同程度的出血淤血，肠黏膜脱落，肠内容物混有血液；全身淋巴结如颌下淋巴结、颈上淋巴结、肠系膜淋巴结等出血、充血、肿胀。胸腹，腹腔和心包内有大量的浆液纤维样渗出物。4 病原鉴定使用发病死亡实验对牛的肝脏和脾脏进行触片检测，经革兰氏、瑞氏和印度墨汁染色并镜检。革兰氏染色发现大量革兰氏染色阴性，大小不一的短杆菌；瑞氏染色结果显示短杆菌两极浓染，符合巴氏杆菌的染色特性；印度墨汁染色结果可见短杆菌周围有明显的荚膜。为了进行进一步的诊断和治疗，使用聚合酶链式反应（PCR）对病原体进行了进一步鉴定，并对其进行药敏试验检测，确定最合适的治疗药物5 分子生物学检测为了对病原体进行进一步检测鉴定，参照文献并设计合成了针对多杀性巴氏杆菌16S r RNA和Kmt1的鉴定引物，随后将无菌采集的病死牛的肝脏置于血清肉汤培养基中进行增菌培养，并用商品化的细菌DNA提取试剂盒提取细菌DNA6 药敏试验为了选择治疗本次疫病的有效药物，对分离到的病原微生物进行药敏检测。挑取单个菌落接种到血清肉汤培养基中进行增菌培养并稀释至合适浓度制备菌悬液，用无菌棉签蘸取菌悬液均匀涂布到血琼脂平板上，待平板干燥后使用无菌的镊子将多种药敏纸片平贴到培养基上，37℃培养24 h后测量药敏纸片的抑菌圈大小，以确定病原体对药物的敏感性。本次分离到的多杀性巴氏杆菌对复方新诺明、新霉素、阿莫西林、庆大霉素、头孢曲松高度敏感，对先锋必、土霉素、磺胺甲恶唑中毒敏感，对青霉素、甲氧芐啶低度敏感，对红霉素、米诺环素、妥布霉素、氟哌酸、林可霉素、头孢孟多、氯霉素耐受。因此，针对本次疫情，建议采用复方新诺明、新霉素、阿莫西林等抗生素进行联合给药和交替给药，以防细菌产生耐药性7 防治方法对发病牛群和健康牛群进行严格的隔离，对牛群圈舍及其饲养的相关用具使用过氧乙酸或氯制剂进行严格消毒，同时对运输发病牛群的车辆及牛群经过的道路进行消毒，每天1次，连续7天。禁止患病牛群及健康牛群的饲养人员相互流动使用复方新诺明、新霉素、阿莫西林等抗生素对发病牛群进行联合给药和交替给药，以防止细菌产生耐药性，视发病牛群的痊愈情况给药3～5天，同时在饲料和饮用水中拌入抗生素和黄芪多糖等添加剂，提高牛群的免疫力。对发病未死亡的奶牛进行牛巴氏杆菌灭活疫苗紧急免疫，每头4～6 m L。经过紧急合理的诊治与防控，联合7天左右的抗生素治疗，除发病初期3头奶牛死亡，其余发病奶牛逐渐痊愈，本次疫情得到了有效的控制。8 体会多杀性巴氏杆菌是一种条件性致病