调味面制品中脱氢乙酸高效液相色谱测定法.pdfVIP

调味面制品中脱氢乙酸高效液相色谱测定法 1 范围 本文件规定了调味面制品制品中脱氢乙酸的测定-高效液相色谱测定方法。 本文件适用于调味面制品中脱氢乙酸的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本 适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文 件。 GB 5009.35 《食品安全国家标准食品中合成脱氢乙酸的测定》 GB/T 6682 《分析实验室用水规格和试验方法》 GB/T 27404 《实验室质量控制规范食品理化检测》 3 术语和定义 3.1 方便食品包括方便面、调味面制品和其他方便食品。其中调味面制品包括产品标 签标识和生产许可申证类别均为调味面制品的产品；其他方便食品（即方便粥、方便盒 饭、冷面及其他熟制方便食品等）包括冲调类方便食品、主食类方便食品和其他类别方便 食品。 3.2 调味面制品：以小麦粉和/或其他谷物粉等为主要原料，添加或不添加辅料，经配 料、挤压熟制、成型、调味、包装等工艺加工而成的即食食品。 4 原理 试样经氢氧化钠溶液提取、除脂，去蛋白，过 0.45um 水相微孔滤膜后注入高效液相色 谱仪，经反相色谱分离，外标法定量。 5 试剂和材料 5.1 材料 5.1.1 水为 GB/T 6682 规定的一级水。 5.1.2 50 mL 塑料离心管。 5.1.3 0.45 μm 亲水相针头滤膜。 5.1.4 注射器。 5.1.5 0.45 μm 水相微孔滤膜和 0.45 μm 有机相微孔滤膜。 5.2 试剂 5.2.1 甲醇(CH OH) ：色谱纯。 3 5.2.2 氢氧化钠(NaOH) 。 5.2.3 正己烷(C H ) 。 6 14 5.2.4 乙酸铵(CH COONH ) ：优级纯。 3 4 5.2.5 硫酸锌(ZnSO ·7H O) 。 4 2 5.3 试剂配制 5.3.1 乙酸铵溶液(0.02mol/L) ：称取 1.54g 乙酸铵，溶于水并稀释至 1L。 5.3.2 氢氧化钠溶液(20g/L) ：称取 20g 氢氧化钠，溶于水并稀释至 1L。 5.3.3 硫酸锌溶液(120g/L) ：称取 120g 硫酸锌，溶于水并稀释至 1L。 5.4 标准品 5.4.1 脱氢乙酸(C H O ，CAS ：520-45-6)标准品：纯度≥99.5% 8 8 4 5.5 标准溶液配制 5.5.1 脱氢乙酸标准贮备液 （1.0 mg/L ）：准确称取脱氢乙酸标准品 0.01000g(精确至 0.0001g)于 10mL 容量瓶中，用 1mL 氢氧化钠溶液 （5.3.2 ）溶解，用水定容。4℃保存，有 效期为 3 个月。 5.5.2 脱氢 乙酸标准工作液 ：分别吸取脱氢 乙酸贮备液 0.1mL 、1.0mL 、5.0mL 、 10mL、20mL 于 100mL 容量瓶 中，用水定容 。配制成浓度为 1.00μg/mL、10.0μg/mL、 50.0μg/mL、100μg/mL、200μg/mL 标准工作液。4℃保存，有效期为 1 个月 6 仪器和设备 6.1 高效液相色谱仪：带二极管阵列或紫外检测器。 6.2 涡旋混合器。 6.3 分析天平：感量 0.01 g 。 6.4 离心机：转速不得低于 4000 r/min 。 6.5 高速粉碎机。 6.6 筛网：1 mm～2 mm 试验筛孔径。 6.7 超声波清洗仪 6.8 PH 计 7 分析步骤 7.1 样品制备与提取 7.1.1 调味面制品：称取样品 2g~5g(精确至 0.001g) ，置于 50mL 离心管中，加入约 10mL 水，5mL 硫酸锌（5.3.3 ）溶液，用氢氧化钠溶液（5.3.2 ）调 pH 至 7.5 ，转移至 25mL 容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。将上述定容溶液转移至离心管中，超声提取 10min， 转移到分液漏斗中，加入 10mL 正己烷，振摇 1min，静置分层，弃去正己烷层，加入 10mL 正己烷