基于网络药理学分析黄芪和枸杞子在糖尿病视网膜病变中的作用暨RIG-I与糖尿病视网膜病变的相关性 药学专业.docVIP

PAGE PAGE I 基于网络药理学分析黄芪和枸杞子在糖尿病视网膜病变中的作用暨RIG-I与糖尿病视网膜病变的相关性 指导教师： 摘 要 糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy，DR）作为糖尿病并发症中较为恶劣的一种，会使患者的视力受到较大的影响，玻璃体会存在积血症状，甚至有可能使患者的视网膜牵拉性脱离，使患者完全失去实力。在生活水平日益提高的今天，DR却越来越常见，这种情况使许多眼科专家对其进行了深入的探讨。 本文主要有两个内容，文献综述，网络药理学和实验成果。 其中前者在收集整合相关领域研究成果的基础上，全面详细地介绍了中医学治疗DR方法的演进，具体内容有：截至目前业内专家对DR发病原理的介绍，治疗DR的实战经验和改进建议，并论述现代医学对于中药对DR治疗机制的研究进展，包括不同单药以及不同中药复方治疗DR的机制研究。 网络药理学部分利用网络药理学及国家专利公布公告网站揭示DR新药研发的规律及黄芪和枸杞子在DR中的作用机制。借助国家专利数据库得到使用率高于同类的中药，进而借助中药系统药理学数据库(TCMSP)获得黄芪和枸杞子的化学成分及其潜在靶标。使用DrugBank数据库、OMIM数据库、DisGeNET数据库、NCBI Gene数据库、GeneCard数据库收集与DR相关的靶基因。利用String数据库分别建立了DR-黄芪、DR-枸杞子共同目标蛋白相互作用网络。通过基因本体论(GO)和京都基因基因组百科全书(KEGG)通路富集分析，进一步探讨黄芪、枸杞子治疗DR的机制及治疗效果。利用Cytosscape软件构建活性组分-作用靶标和蛋白-蛋白质相互作用(PPI)网络的网络图。结果显示从国家专利数据库中筛选出49项治疗DR的专利中药复方，最终分析得出黄芪和枸杞子出现频次最高。随后分别从黄芪、枸杞子中筛选出20种和45种有效成分，以及65个和63个已鉴定的与DR的靶点重叠，黄芪和枸杞子的潜在靶点有59个重合的地方。经过具体的研究，发现kaempferol、quercetin、isorhamnetin以及formononetin与AKT1、VEGFA、CASP3、IL-6、NOS 3、PTGS2等靶标具有良好的结合活性。GO富集分析显示这些靶点与不同氧气含量甚至不含氧环境下它的变化、氧气含量变低时它的变化、加入脂多糖时它的变化、活性氧代谢机制、血管的诞生和成熟等存在一定的联系。Kegg通路富集分析提示，黄芪与枸杞子的潜在靶点在AGE-RAGE信号通路，细胞衰老通路富集。 实验研究部分利用ELISA对9例行玻璃体切割的PDR患者的玻璃体进行检测，并与行玻璃体切割的黄斑前膜及孔源性视网膜脱离患者比较。旨在观察两组患者RIG-I蛋白差异，为防治DR提供新的诊疗思路。结果显示PDR患者与对照组相比，RIG-I表达增加（P0.05）。随后有利用免疫荧光技术对大鼠视网膜石蜡切片进行检查，糖尿病造模成功后3月视网膜组织切片荧光显著强于正常同月龄大鼠及糖尿病造模成功2月大鼠。研究表明，RIG-I与DR有明显的相关性。 关键词：黄芪 枸杞子 糖尿病视网膜病变 网络药理学 RIG-I PAGE PAGE iii Analysis of the role of Radix Astragali and Fructus Lycii in DR based on Network Pharmacology＆The relationship between RIG-I and DR Name: Supervisor: ABSTRACT Diabetic retinopathy (DR) is one of the serious complications of diabetes. It often leads to decreased vision, visual field defects, vitreous hemorrhage, and even traction retinal detachment and eventually blindness in severe cases. With the improvement of the quality of life, the prevalence of DR continues to increase, which has attracted increasing attention from ophthalmologists. This paper consists of two parts: literature review, network pharmacology and experimental research. The