第四章 酶联免疫吸附试验.pdfVIP

第四章酶联免疫吸附试验 · 第一节 ELISA的类型 · 第二节 ELISA需要的仪器及耗材 ·第三节 ELISA需要的试剂 ·第四节 ELISA操作步骤 ·第五节 ELISA结果判断 坏绕微生物学·第九章资峰、与环绕友好微生物 华中坪范大学生今科学院微生物学教研室-杨继红 、/一、一 刚百 · 酶联免疫吸附试验英文为Enzyme Linked Immunosorbent Assay ，首字母缩回各为ELISA。 • 1971年发表的两篇文章，使得1966年开始用于抗原定位的 酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法O • Engvall E , Perlman P (1971). Enzyme-linked immuno sorbent assay (ELISA). Quantitative assay of immunoglobulin G. lmmunochemistη8， (9): 871-4. • Van Weemen BK, Schuars AH (1971). Immunoassay using antigen-enzyme conjugates. FEBS Letters 15 (3): 232-6. · 同义词: 酶免疫试验，英文Enzyme Immuno Assay ，首字 母缩略为EIA。 坏绕微生物学·第九章资峰、与环绕友好微生物 华中坪范大学生今科学院微生物学教研室-杨继红 、，、 → 目U~ 一、 ELISA基本原理 · 抗原或抗体物理吸附到固相载体表面，并保持其免疫活性。 · 抗原或抗体通过共价键与酶连接形成酶结合物，即酶标记 抗原或酶标记抗体，而这种酶标抗原或酶标记抗体既保留 抗原或抗体的免疫活性，又保留酶活性。 · 酶结合物与相应抗原或抗体结合后，加入酶反应底物后， 底物被酶催化变为有色产物，根据颜色反应来判定是否有 免疫反应的存在，而且颜色深浅与酶结合物量，即标本中 相应抗原或抗体量成正比，因此可根据颜色有无和深浅进 行定性或定量分析O 坏绕微生物学·第九章资峰、与环绕友好微生物 华中坪范大学生今科学院微生物学教研室-杨继红 、/一、一 目川百 二、 ELISA的特点 1 、高度特异性 · 由于ELISA法一方面是建立在抗原与抗体免疫学反应的基 础上，因而，具有特异性。 2、高度灵敏性 · 酶标记抗原或抗体是酶分子与抗原或抗体分子的结合物， 它可以催化底物分子发生反应，由于酶的高效生物催化作 用，一个酶分子在数分钟内可以催化几十、几百个底物分 子发生反应，产生了放大作用，使得原来极其微乎其微的 抗原或抗体在数分钟后就可被识别出来，使本法具有很高 的敏感性O 坏绕微生物学·第九章资峰、与环绕友好微生物 华中坪范大学生今科学院微生物学教研室-杨继红 第一节 ELISA的类型