生物大分子分离纯化技术（159页）.pptVIP

盐析的机理 ①盐离子与蛋白质分子争夺水分子，降低了用于溶解蛋白质的有效水量，减弱了蛋白质的水合程度，破坏了蛋白表面的水化膜，导致蛋白质溶解度下降； ②盐离子电荷的中和作用，使蛋白质溶解度下降； ③盐离子引起原本在蛋白质分子周围有序排列的水分子的极化，使水活度降低。 S Log ━━ = —Ks?I ① S0 S0——蛋白质在纯水（离子强度I=0）中的溶解度。 S ——蛋白质在溶液的离子强度为I时的溶解度。 Ks——盐析常数。 1 I = ━━ εmi Zi 2 ② 2 mi——溶液中各种离子克分子浓度（物质量浓度） Zi——各种离子的价数 ①式中当T为一定时，So对于某一蛋白质在某一溶液中的溶解度为一常数，故①式可改写为 LogS=β—Ks×I ③ 式②中β=LogSo也为一常数，β值主要取决于蛋白质的性质，溶液的pH和温度。 Ks值主要和盐的性质（包括盐离子价数和平均半径）有关，也和蛋白结构有关。 一般来说蛋白在某一盐溶液中Ks越大，盐析效果越好，根据③式分离纯化蛋白质和酶，可以在一定的pH及温度下改变盐的I值，称为“Ks分段盐析法”，提纯前期常应用此法。 在一定I值时，改变pH及温度称为“β