高效液相色谱法（166页）.pptVIP

3. 使用混合有机溶剂 若二元溶剂系统不能达到所需的分离效时，可以使用三元或四元的混合溶剂系统。如 当分离更复杂的混合物时可采用如下优化方法进行 （二） 酸性和碱性化合物的分析（反相） 酸性化合物和碱性化合物在建立反相键合相色谱方法时与中性样品相似，可以从中性样品的分离条件开始，区别是需向流动相中加入某些PH值调节剂和缓冲盐。 在分离极性很大的化合物，特别是离子型或能电离的化合物时，它们常常很快被洗脱，即使改变流动相组分及其比例也不能改变保留值，此时可通过调节流动相的PH值或利用同离子效应，抑制样品组分的解离，增加其在固定相中的溶解度，以达到分离有机弱酸，弱碱的目的，这种方法称离子抑制色谱（ion suppression chromatography, ISC）。 1.pH值的选择 离子抑制色谱法适合3.0≤pKa ≤ 7.0的弱酸，7.0 ≤ pKb ≤ 8.0的弱碱或两性化合物，如分析弱酸时，可向流动相中加入适量甲酸，醋酸，磷酸等降低流动相酸度，当pH＜pKa时，弱酸性化合物的解离度受到抑制，药物多数以分子形式存在，从而获得对称的色谱峰，若分析有机弱碱，可向流动相中加入适量三乙胺，氨水，可达到同样的效果。 2. 缓冲剂的选择 加入一定量的具有一定pH值的缓冲溶液，可以达到维持组分在柱内的平衡，得到较好