遗传学与表观遗传学之遗传的细胞基础与染色体病研究策略(122页).pptVIP

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  • 2021-08-08 发布于湖南
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遗传学与表观遗传学之遗传的细胞基础与染色体病研究策略(122页).ppt

* 正常人外周血或细胞 RPMI1640培养基+15%小牛血清=5ml 370C,培养68 hr 加秋水仙素,培养2~4 hr(抑制细胞分裂) 收集细胞 离心,去上清液(1000rpm/10 min) 低渗处理,0.075 M KCI,370C,25min 预固定,甲醇:冰醋酸=3:1 离心,去上清液(1000rpm/10 min) 重复固定三次 制片,染色,观察,染色体分析 1. 染色体制备 * 2. 染色体显带 染色体显带:经不同的方法处理染色体,经染色后使染色体在纵轴上显示明、暗或着色深、浅相间的横纹即显带(Banding)。 这种带对每一条染色体来说都是独特的,可以区分和确认每一条染色体。 * 显带方法: G-显带:是最常用的方法。标本经胰蛋白酶处理后,应用Giemsa染色,镜检、分析,显示深染和浅染相间的带纹。 * 46, XY * 46, XX * 常规G-banding使每个单倍体(24条染色体)都可以显示350~550条带, 每条带大约代表5x106~10x106bp的DNA。 估计平均每3000bp为一个基因,每条染色体可能代表几个或几百个基因. *

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