蛋白质与氨基酸测定.pptVIP

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;第 一 节 概 述 ;;第二节 蛋白质的定量测定;;; 一般蛋白质含氮量为16%,即一份氮素相当于6.25份蛋白质,此数值称为蛋白质系数,不同种类食品的蛋白质系数有所不同,如玉米,荞麦,青豆,鸡蛋等为6.25,花生为5.46,大米为5.95,大豆及其制品为5.71,小麦粉为5.70,牛乳及其制品为6.38。 ;;;;整个过程分三步:消化、蒸馏与吸收、滴定。 ① 消化 浓硫酸具有脱水性,使有机物脱水后被炭化为碳、氢、氮。浓硫酸又具有氧化性,将有机物炭化后???碳化为二氧化碳,硫酸则被还原成二氧化硫 2H2SO4 +C =2SO2+ 2H2O +CO2 二氧化硫使氮还原为氨,本身则被氧化为三氧化硫,氨随之与硫酸作用生成硫酸铵留在酸性溶液中。 H2SO4+2NH3=(NH4)2SO4 ; 2NH2(CH2)2COOH+13H2SO4 ;;;;;②蒸馏与吸收 在消化完全的样品溶液中加入浓氢氧化钠(40%)使呈碱性,加热蒸馏,即可释放出氨气,用4%硼酸吸收或用过量的 H2SO4 或 HCl 标准溶液吸收,反应方程式如下: Ⅰ)用硼酸吸收 2NaOH+(NH4)2SO4=2NH3↑+Na2SO4+ 2H2O 2NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O Ⅱ)用过量的 H2SO4 或 HCl 标准溶液吸收 2NaOH+(NH4)2SO4=2NH3↑+Na2SO4+ 2H2O 2NH3 + H2SO4(或HCl) = (NH4)2SO4(或NH4Cl) ;;;;(2)仪器 ①500ml凯氏烧瓶 ②常量定氮蒸馏装置 (3)试剂 ①硫酸铜②硫酸钾③硫酸 ④?40g∕L硼酸溶液;⑤ 混合指示剂:1g∕L甲基红乙醇溶液与1g∕L甲基蓝乙醇 溶液,临用时按2:1的比例混合。或者1g∕L甲基红乙醇溶液与1g∕L溴甲酚绿乙醇溶液,临用时按1:5的比例混合;⑥ 400g∕L氢氧化钠;⑦0.1mol∕L盐酸标准溶液; ;;;;;;;;;; ; ;;;;;;;;;;;;;改良式凯氏定氮装置;;;;;; ;;;;;;;;;第 四 节 氨 基 酸 测 定 ;;;;;;;5、结果计算;;;;;;;;;;;;;;;;;;;

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