高中生物选修三知识点整理(完整加强版).docx

生物选修 3 学问点（区分不同工程和不同操作水平）专题 1基因工程进行严格的设计，通过体外 DNA重组和转基因技术，给予生物概念： 依据人们的愿望，新的遗传特性，制造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品；基本原理：让目的基因在受体细胞内稳固且高效的表达理论基础： DNA 是生物遗传物质的发觉， DNA 生物选修 3 学问点 （区分不同工程和不同操作水平） 专题 1 基因工程 进行严格的设计，通过体外 DNA重组和转基因技术，给予生物 概念： 依据人们的愿望， 新的遗传特性，制造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品； 基本原理：让目的基因在受体细胞内稳固且高效的表达 理论基础： DNA 是生物遗传物质的发觉， DNA 双螺旋结构，遗传信息传递方式 核心：构建重组 DNA 分子 （一）基本工具（技术基础） Cf 工具 工具酶 1. 限制性核酸内切酶 （1）来源：主要是从原核生物中分别纯化出来的 （不切割自身 DNA的缘由：原核生物中无该限制酶的识别序列或其已被修饰） （2） 功能 ：识别和切割 DNA分子内一小段特别的脱氧核苷酸序列（偶数碱基对回文序列） 特异性表现： 识别特定片段， 切割该片段中的特定位点， 形成一种末 端 Cf —G↓ GATCC— —↓ GATC— （3）结果： DNA片段末端形成末端碱基互补的黏性末端或平末端 ① 用 切割（质粒） ②依据目的基因的位置或剪辑序列来确定限制酶的种类 ③切割后的片段要画全 2.DNA 连接酶 （1） 功能 ：连接具有末端碱基互补的 2 个 DNA片段，形成重组 DNA分子 Cf DNA 聚合酶：只能将单个脱氧核苷酸逐个添加到已有的脱氧核苷酸链之后， 需模板 DNA，连接磷酸二酯键 3. 载体 （1） 条件 ：①能在受体细胞中稳固储存并大量复制，基本不影响受体细胞正常生命活动 DNA片段插入 ②一至多个限制酶酶切位点（必需在所需标记基因外），供外源 DNA分子的受体细胞 ③标记基因，便于挑选含有重组 ——往往需要依据需求改造自然载体 （2） 功能 ：①作为运载工具将目的基因转移到受体细胞内 ——载体选质粒的缘由：具有环状结构，能够携带目的基因 ②利用它在受体细胞内对目的基因进行大量复制和转录 （3）质粒（最常用的载体） / 表达 在细菌 ( 或酵母菌 ) 中独立于染色体之外存在的双链环状 DNA 一种能够自主复制， 分子 （4）其它载体：噬菌体，动植物病毒 ( 二) 基因工程的基本操作程序 第一步：猎取目的基因 目的基因：人们所需要的编码蛋白质的结构基因 方法 (1) 序列已知 ①化学合成法 ——较长 DNA单链合成过程中简洁显现碱基缺失如 反转录法 （ e.g 猎取 mRNA逆转录成 cDNA再用 DNA聚合酶生成双链）(PCR)扩增Polymerase Chain Reaction② 聚合酶链式反应（ 1）原料 ：水，缓冲液， 4 种游离脱氧核苷酸，TaqDNA聚合酶，模板DNA(基因 ) ①化学合成法 ——较长 DNA单链合成过程中简洁显现碱基缺失 如 反转录法 （ e.g 猎取 mRNA逆转录成 cDNA再用 DNA聚合酶生成双链） (PCR)扩增 Polymerase Chain Reaction ② 聚合酶链式反应 （ 1）原料 ：水，缓冲液， 4 种游离脱氧核苷酸， TaqDNA聚合酶，模板 DNA( 基因 ) ， 2 段 DNA引物（防止相互或自身折叠） 90～95℃， DNA在高温下变性解链 对 基因特异的 （ 2）过程：第一步：加热至 其次步：冷却到第三步：加热至 55～60℃，引物结合到互补 DNA链（退火） 70～75℃，热稳固 DNA聚合酶从引物起始互补链的合成 能量来源于 dNTP (2) 序列未知 建立基因文库： 建立一个包括目的基因在内的基因文库 ( 储存在受体菌中 ) ，再从基因文库中猎取 3. 目的基因大量扩增 / 分子水平的克隆 ①利用受体细胞（如 E.coli ）无性繁殖，利用基因探针钓取，再导入最终受体细胞 e.g 目的基因→大肠杆菌→农杆菌→植物细胞→植物 （主要在细菌分裂时几何级扩增，尽管质粒独立于拟核，可在分裂时发生自我复制， 但由于多数细菌对胞内质粒数量有限制，故该种复制对扩增成效不大） ② PCR技术 DNA分子（基因表达载体：启动子＋目的基因＋终止子＋标记基因） 其次步：形成重组 目的 ：转运目的基因， 并使在受体内稳固存在， 复制， 表达 / 转录并稳固遗传 （基因型 过程： （ 1）单酶切：用同种限制酶分别切割目的基因和载体从而形成相同的粘性末端， 然后用 DNA连接酶将目的基因和载体连接起来 ——有时用不同限制酶也可以形成相同的粘性末端 （2）双酶切：用两种限制酶切割使目的基因和载体两端各形成两种粘性