常见蛋白酶抑制剂.docVIP

当前位置：生物帮〉实验 技巧〉生物化学技 术〉正文 时间：2021.02.09 创作人：欧阳历 蛋白酶及蛋白酶抑制剂大全 日期：2012-06-13 来源：互联网 标签： 相关专题：解析蛋白酶活性测定聚焦蛋白酶研究新进展 摘要：破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶，这些 蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。在蛋白质 提取过程中，需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。以下 列举了 5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点，因 为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同，因此需要调 整各种蛋白酶的浓度 恩必美生物新一轮2-5折生物试剂大促销！ Ibidi细胞灌流 培养系统■模拟血管血液流动状态下的细胞培养系统广州赛 诚生物基因表达调控专题 蛋口酶抑制剂 破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶，这些蛋白 酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。在蛋白质提取 过程中，需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。以下列举 了 5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点，因为各 种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同，因此需要调整各 种蛋白酶的浓度。由于蛋白酶抑制剂在液体中的溶解度极 低，尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀 以减少蛋白酶抑制剂的沉淀。在宝灵曼公司的目录上可查到 更完整的蛋白酶和蛋白酶抑制剂表。 常用抑制剂 PMSF 1） 抑制丝氨酸蛋白酶（如胰凝乳蛋白酶，胰蛋白酶，凝血 酶）和疏基蛋白酶（如木瓜蛋白酶）； 2） 10mg/ml溶于异丙醇中； 3） 在室温下可保存一年； 4） 工作浓度:17 ?174ug/ml（0?l~l?0mmol/L）; 5） 在水液体溶液中不稳定，必须在每一分离和纯化步骤 中加入新鲜的PMSFo EDTA 抑制金属蛋白水解酶； 0.5mol/L 水溶液，pH8?9; 溶液在4°C稳定六个月以上； 工作浓度:0?5~1.5mmol/L. (0?2~0?5mg/ml); 加入NaOH调节溶液的pH值，否则EDTA不溶解。 胃蛋白酶抑制剂(pepstant in) 抑制酸性蛋白酶如胃蛋白酶，血管紧张肽原酶，组织 蛋白酶D和凝乳酶； lmg/ml溶于甲醇中; 3｝储存液在4°C一周内稳定，?20°C稳定6个月； 1 作浓度:0.7ug/ml(lumol/L) 在水中不溶解。 亮抑蛋白酶肽(leupept in) 抑制丝氨酸和铳基蛋白酶，如木瓜蛋白酶，血浆酶和 组织蛋白酶B; 10mg/ml 溶于水； 储存液4°C稳定一周，?20°C稳定6个月； 工作浓度0.5mg/mlo 胰蛋白酶抑制剂(aprot inin) 抑制丝氨酸蛋白酶，如血浆酶，血管舒缓素，胰蛋白 酶和胰凝乳蛋白酶； 10mg/ml 溶于水,pH7~8 3｝储存液4°C稳定一周，?20°C稳定6个月； 工作浓度:0?06 ?2?0ug/ml(0?01~0?3umol/L); 避免反复冻融： 在pH12.8时失活。 蛋白酶抑制剂混合使用 35ug/ml PMSF 丝氨酸蛋白酶抑制剂 0.3mg/ml EDTA 金属蛋白酶抑制剂 0.7ug/ml胃蛋白酶抑制剂(Pepstatin)--?性蛋白酶抑 制剂 0.5ug/ml亮抑蛋白肽酶(Leupeptin) 疔谱蛋白酶抑 制剂 常用蛋白酶抑制剂表 抑制剂 靶蛋白酶 有效浓度 储藏溶液 注解 Antipain 木瓜酶和胰酶 SOpig/ml lmg/ml水溶液 对胰凝蛋白酶，胃 液素，纤溶酶无影 响 APMSF 胰蛋白酶样幺攵氨酸 蛋白酶 10-40pg/ml 或 10-20pM 100mmol/L水溶液 毒性比PMSF低，不 能抑制胰凝蛋白酶  或乙酰胆碱酯酶 抑肽酶 线氨酸蛋白酶 0.06-2ng/ml lOmg/mIPBS 溶液 避免反复动冻融 抑氨肽爾B 氨基肽酶 40pig/ml 溶于甲醇 不能抑制竣肽酶 Calpain抑制剂I、 n Calpain (钙依赖性 半胱氨酸蛋白酶) 1:17pg/ml n：7pig/ml 溶于乙醇 可渗透薄膜 抑糜阮酶素 胰凝乳蛋白酶 6-60ng/ml 溶于DMSO B.M.综合酶片 丝氨酸，半胱氨酸 和金属蛋白酶 每10-50ml细胞提 取液内加一片 不含EDTA EDTA 金属蛋白酶 0.2-0.5mg/ml 或 0.5-1.3pmol/L 500mmol/L水溶液 pH=8.0 抑蛋白酶醛肽 丝氨酸蛋白酶，兢 基蛋白酶 0.5-2ng/ml 10mg/ml水溶液 a2-巨球蛋白 广谱 lU/ml 100 U/ml PBS 溶液 避免接触还原剂 Pefabloc SC(boe- hringer Mannheim) 丝氨酸蛋白酶 0.1-1.0mg/ml 或 0.4-4mmol/L 100mM水溶液 无毒，在中性pH下 较PMSF稳圧 胃蛋白酶抑制