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【考向解读】
1.微生物的分离和培养
2.培养基对微生物的选择利用
3.运用发酵加工食品的基本方法
4.利用微生物发酵来生产特定的产物
1.植物组织培养
2.从生物材料中提取某些特定的成分
高频考点:微生物的培养与应用
中频考点:植物有效成分的提取
低频考点:传统发酵技术的应用、植物组织培养
【命题热点突破一】微生物的培养与分离
1.培养基的成分:碳源、氮源、水和无机盐等。
2.细菌培养和计数方法
(1)稀释涂布平板法:分离细菌,也能计数(结果偏小)。
(2)平板划线法:只能纯化细菌,不能计数。
(3)显微计数法:不能区分细菌死活(结果偏大)。
3.灭菌常考的3种方法
(1)灼烧灭菌(如接种环、接种针、试管口等)
(2)干热灭菌(如玻璃器皿和金属用具等)
(3)高压蒸汽灭菌(如配制的培养基等)
4.筛选尿素分解菌:用以尿素为唯一氮源的培养基。
5.筛选纤维素分解菌:用以富含纤维素、添加刚果红的培养基培养(出现明显透明圈)。
例1.(2016·高考全国乙卷)空气中的微生物在重力等作用下,可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平
板收集教室空气中的微生物,以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下:
①配制培养基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H O);2
②制作无菌平板;
③设置空白对照组和若干实验组,进行相关操作;
④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间,统计各组平板上菌落的平均数。
回答下列问题:
(1)该培养基中微生物所需的氮来源于________。若要完成步骤②,该培养基中的成分X通常是
·1·
________。
(2)步骤③中,实验组的操作是________。
(3)若在某次调查中,某一实验组平板上菌落平均数为36 个/平板,而空白对照组的一个平板上出现了6
个菌落,这种结果说明在此次调查中出现了________现象。若将 30(即 36-6)个/平板作为本组菌落数的
平均值,该做法________(填 “正确”或 “不正确”)。
【答案】(1)牛肉膏、蛋白胨 琼脂 (2)将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上,开盖暴露
一段时间 (3)污染 不正确
【变式探究】(2015·全国卷Ⅰ)已知微生物A 可以产生油脂,微生物B 可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂
可用于生物柴油的生产。回答有关问题:
(1)显微观察时,微生物A 菌体中的油脂通常可用________染色。微生物 A 产生的油脂不易挥发,可选
用________(填 “萃取法”或 “水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取。
(2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B 的单菌落,可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取
样,并应选用以________为碳源的固体培养基进行培养。
(3)若要测定培养液中微生物 B 的菌体数,可在显微镜下用________直接计数;若要测定其活菌数量,
可选用________法进行计数。
(4)为了确定微生物 B 产生的脂肪酶的最适温度,某同学测得相同时间内,在35 ℃、40 ℃、45 ℃温度
下降解 10 g油脂所需酶量依次为 4 mg、1 mg、6 mg,则上述三个温度中,________℃条件下该酶活力
最小。为了进一步确定该酶的最适温度,应围绕________℃设计后续实验。
【解析】 (1)油脂可被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色,被苏丹Ⅳ染液染成红色,因此油脂通常用苏丹Ⅲ或苏
丹Ⅳ染色。不易挥发的物质大多采用萃取法进行提取,水蒸气蒸馏法一般用来提取易挥发的物质。
(2)能产生脂肪酶的微生物B 能利用脂肪(油脂)作为碳源,所以在制备选择微生物B 的培养基时,应将
油脂作为唯一的碳源。
(3)用显微镜直接对微生物进行计数,需要用血细胞计数板。如果对活菌进行计数,则要用稀释涂布平
板法涂布平板,培养后统计菌落数目,然后计算出活菌数量。(4)降解等量的油脂,需要的酶量越多,
·2 ·
说明此温度下的酶的活力越小。所以三种温度中45℃下酶的活力最小。从三种温度下的实验结果可知,
40 ℃下酶的活力最大,所以要想测定该酶的最适温度,应围绕该温度设计不同温度梯度,进行后续实
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【答案】 (1)苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ) 萃取法 (2)油脂 (3)血细胞计数板 稀释涂布平板 (4)45 40
【变式探究】(2015·江苏高考)人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃,可用来发酵处理秸秆,提高秸秆的
营养价值。为了增强发酵效果,研究人
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