（建筑工程管理）基因工程试题.pdfVIP

（建筑工程管理）基因工程 试题 二、名词解释（每题 2 分，共 20 分） 1 、Southernblotting:Southern 印迹 Southern 发明的壹种影印转移物质的方法。 2 、Cosmidvector:黏粒载体：含有 cos 位点的质粒载体。 3 、cDNAlibrary:cDNA 文库：是指某生物某壹发育时期所转录形成的 cDNA 片段和某种载体 连接而成的克隆的集合。 4 、RACE:是壹种通过 PCR 进行 cDNA 末端快速克隆的技术，是以mRNA 为模板反转录成 cDNA ， ， 第壹链后用PCR 技术扩增出某个特异位点到 3 或 5 端之间未知序列的方法。 5 、Probe:探针：指被标记物质标记了的核酸。 6 、RT-PCR 逆转录 PCR ：先用逆转录酶作用于mRNA ，以寡聚dT 为引物合成 cDNA 第壹链， 然后用已知壹对引物，扩增嵌合分子，这种方法称为逆转录 PCR 。 7 、Insertinactivation:插入失活，基因工程载体上的某些选择标记基因常常含某种或某几 种限制性内切酶的单壹酶切位点，在该位点用相应的限制性内切酶处理，且将外源 DNA 片段 插入该位点，则插入的外源 DNA 片段将破坏原有基因的读码框，往往导致原有的选择标记基 因无法翻译表达，或即使翻译表达，形成的也是丧失了原有生物活性的蛋白质，这壹现象称 为插入失活。。 8 、S-DSequence:S-D 序列：在大肠杆菌 mRNA 的核糖体结合位点上，含有壹个转译起始密码 ， 子及同 16S 核糖体 RNA3 末端碱基互补的序列，该序列最初由 Shine 、Dalgarno 发现，故后 来命名为Shine—Dalgarno 序列，简称 S-D 序列。 9 、Shuttleplasmidvector:穿梭质粒载体：指壹类由人工构建的具有俩种不同复制起点的选 择标记，因而可在俩种不同宿主细胞中存活和复制的质粒载体。 10 、MCS:指载体上人工合成的含有紧密排列的多种限制核酸内切酶的酶切位点的 DNA 片段。 三、简答题（每题 5 分，共 25 分） 1 、理想质粒载体的必备条件？ 答：⑴具有较小的分子质量和较高的拷贝数。 ⑵具有若干限制性核酸内切酶的单壹酶切位点。 ⑶具有俩种之上的选择标记基因。 ⑷缺失 mob 基因。 ⑸插入外源基因的重组质粒较易导入宿主细胞且自制和表达。 2 、核酸操作的基本技术有哪些？ 答：①核酸提取和纯化 ②核酸的检测和保存 ③核酸的凝胶电泳 ④核酸分子杂交 3 、影响核酸保存的关键因素是什么？怎样保存核酸制品？ 答 关键因素 ①保存液的酸碱度②保存温度 保存方法 ①壹般保存可用浓盐液，NaCL-柠檬酸缓冲液或 0.1mol/L 醋酸缓冲液。②对 DNA 来说， 在 pH4～11 的范围分子的碱基较稳定，超出此范围DNA 易变性或降解，低温、稀碱下保存DNA 及低温下保存 RNA 均较稳定 。③固态核酸通常在0℃之上低温干燥保存即可。 4 、合成cDNA 第二链的主要策略有哪些？ 答：①自身引导合成法 ②置换合成法 ③PCR 合成法 ④快速扩增 cDNA 末端法 ⑤双链 cDNA 末端的处理 ⑥cDNA 和载体的连接 5 、基因工程诞生的理论基础是什么？ 答：是现代分子生物学领域理论上的三大发现和技术上的三大发明。 理论上的三大发现 ①证实了 DNA 是遗传物质 ②揭示了 DNA 分子的双螺旋结构模型和半保留复制机理 ③遗传密码的破译和遗传信息传递方式的确定 技术上的三大发明 ①限制核酸内切酶的发现和 DNA 切割 ②DNA 连接酶的发现和 DNA 片段的连接 ③基因工程载体的研究和应用 四、问答题（每题 10 分，共 40 分） 1PCR 技术主要应用在哪些领域？ 答：①核酸基础研究 ②序列分析 ③检测基因表达 ④从 cDNA 文库中放大特定序列 ⑤研究已知片段邻近基因或未知 DNA 片段 ⑥进化分析 ⑦医学应用 ⑧分析生物学证据 ⑨性别控制 ⑩转基因检测。 2 细菌的限制和修饰系统有什么意义？大肠杆菌K12 限制和修饰系统的遗传分析揭示的4 种 表型是什么？？ 答：宿主控制的限制和