第四章培养基及培养基灭菌设备.ppt

第四章培养基及培养基灭菌设备;一、培养基概述;（二）培养基准备及要求;2.动物细胞培养基： 要求较高，一般合成培养基、无血清培养基 灭菌：微孔滤膜过滤灭菌 3.植物细胞培养基： 组分：无机盐类，碳源，维生素，植物生长激素，有机氮源，有机酸等 灭菌：115-120℃，保持15-20min 微孔滤膜过滤灭菌 ;二、培养基灭菌;4、灭菌的方法 ①化学灭菌： ②射线灭菌： ③过滤灭菌： 微孔滤膜过滤除菌；大多用于热敏性物料 ④干热灭菌法： 常用于空玻璃器皿、金属器具的灭菌。 ⑤湿热灭菌： 121℃，保持20~30min ;干热灭菌;射线灭菌;射线灭菌;过滤除菌;过滤除菌;湿热灭菌;5、湿热灭菌原理 （1）原理： 蒸汽在冷凝时释放出大量潜能，并且具有强大穿透力，在高温和水存在时，微生物细胞中的蛋白质极易发生不可逆凝固性变性，致使微生物在短时间内死亡。 湿热灭菌的效果，取决与致死温度和致死时间。 (2)培养基灭菌温度的选择 考虑的因素：a.高于微生物的热致死温度 b.营养成分的破坏 ;三、培养基工业灭菌及设备;3、分批灭菌的操作过程（书P5）; 全过程： 升温、保温、冷却 三路进汽：蒸汽从空气管道、取样管和出料管进入罐内直接加热，直到所规定的温度，并维持一定的时间。这就是所谓的“三路进汽”。 注：凡是与培养基接触的管道都要进汽；凡是不与培养基接触的管道都要排汽;（二）连续灭菌 1、概念： 培养基在发酵罐外经过一套灭菌设备连续的加热灭菌，冷却后送入已灭菌的发酵罐内的工艺过程称为连续灭菌（连消）。 空罐灭菌也称空消。无论是种子罐、发酵罐、还是消泡罐，当培养基（或物料）尚未进罐前对罐进行预先灭菌，称为空罐灭菌。 2、优缺点： 优点：可采用高温快速灭菌工艺；发酵罐非生产占用时间缩短，容积利用率提高；热能利用率合理，适于自动化控制 缺点：不适合高粘度的培养基的灭菌；染菌可能性增高;;;3、连续灭菌流程及设备 ★连消塔—喷淋冷却流程：;★喷射加热—真空冷却流程：;★板式换热器灭菌流程;★连消塔： 内外两根管子套合而成； 2-3 m 高； 停留时间一般20-30s； 线速度要求 小孔倾斜向下45°； 小孔上稀下密； ☆关键： 小孔的加工及分布 ;★连消器： 高度0.5 m 左右； 弧形挡板； ☆优点： 性能稳定；无噪声；无震动 ;★喷射加热器： 蒸汽和料液迅速接触充分混合，加热是在瞬时完成；结构简单，操作时无噪声;（2）保温设备;（3）冷却设备 ☆真空冷却器： 当高温培养基进入真空冷却器后，在真空下，水分立即汽化，使培养基本身温度下降，达到冷却目的。 ;☆喷淋冷却器（P17）： 将水通过喷淋装置均匀地淋在水平的排管上，以冷却管内的培养基。; ☆套管冷却器 套管冷却器是一种内管走热培养基，内外管间的管隙中走冷却水的冷却器。操作时，冷热两流体流向相反，以提高平均温度差，节约用水。; ☆板式换热器 板式换热器是用薄金属板压制成具有一定波纹形状的换热板片，然后叠装，用夹板、螺栓紧固而成的一种换热器。主要由框架和板片两大部分组成 ;工作流体在两块板片间形成的窄小而曲折的通道中流过。冷热流体依次通过流道，中间有一隔层板片将流体分开，并通过此板片进行换热。