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选择雌性小鼠的一般原因 1.雌鼠性情温顺,公鼠易打斗 2.雌鼠免疫反应强 本实验选择雌性小鼠的原因是? 实验器材 YLS-6B智能热板仪、1mL注射器、12号灌胃针头 三个关键 1.表面的导热性和光洁度 2.温度控制 3.计时的准确程度 药品 配制75mg/mL阿司匹林溶液、3mg/mL磷酸可待因溶液,两者按1:1 体积比配制混合溶液(25:1)、生理盐水 实验步骤与分组 宋毅涵 实验步骤与分组 1)先测定给药前各组动物的痛反应阈值,选取体重在18g一22 g,痛阈值在5~30 s的雌性小鼠,随机分成15组,并编号1—20,每组20只小鼠。实验室温度控制在20℃~25℃。 2)1-5组、5-10组、11-15组、15-20组分别注射0.10mL 、0.20mL 、0.30mL、0.40mL 、0.50mL的阿司匹林溶液(50mg/mL)、 磷酸可待因溶液(2mg/mL ) 、混合溶液(25:1)和生理盐水 3)于给药后1 h分别将各组小鼠置于55℃±0.5℃的热板测痛仪的金属板上,以舔后足作为痛反应指标,记录小鼠投入热板至舔后足的时间作为痛反庙闺值,以痛反应阈值超过60 S作为有效指标,计数痛反应时间超过60 s的动物数, 小鼠捉拿 从笼盒内将小鼠尾部捉住并提起,放在笼盖(或表面粗糙的物体)上,轻轻向后拉鼠尾,在小鼠向前挣脱时,用左手(熟练者也可用同一只手)拇指和食指抓住两耳和颈部皮肤,无名指,小指和手掌心夹住背部皮肤和尾部,并调整好动物在手中的姿势。 小鼠灌胃 1. ?准备灌胃针头。一般可以从市场上面买到,实在没有的话,可以用12号的针头,剪去针尖,用砂纸将头端磨平,也可以用。但是买的灌胃针头的头端用锡或者适宜的方法处理了针头的锐口,自己用砂纸不可能将所有的锐口都磨掉,用这样的针头灌胃,损失小鼠食道的可能性比较大。 2. ?抓住小鼠,使其头、颈和身体呈一直线。抓小鼠的动作很简单,左手的小指和无名指抓住小鼠的尾巴,另外三个手指抓住小鼠的颈部即可。因为小鼠始终在活动中,若一次抓的感觉不是很顺手,要放开重新抓,不要逞强进行下一步操作。 3. ?抓好小鼠就可以灌胃了,一般用1 ml的注射器配灌胃针头。灌胃针头从小鼠的嘴角进入,压住舌头,抵住上颚,轻轻向内推进,进入食管后会有一个刺空感,进入食道后就可以推注药液了。 4. 灌胃容积一般是0.1~0.2 ml/10 g,最大0.35 ml/10 g,每只小鼠的灌胃最大容积不超过0.8 ml。 结果分析 张敏洁 结果分析 生理盐水(mg/kg) 痛反应时间超过60S的动物数(只) 镇痛有效率(%) 表1.生理盐水灌胃小鼠热板致痛反应(n=20) 结果分析 阿司匹林(mg/kg) 痛反应时间超过60S的动物数(只) 镇痛有效率(%) 表2.阿司匹林对小鼠热板致痛反应的镇痛作用(n=20) 结果分析 磷酸可待因(mg/kg) 痛反应时间超过60S的动物数(只) 镇痛有效率(%) 表3.磷酸可待因对小鼠热板致痛反应的镇痛作用(n=20) 结果分析 复方混合物(阿司匹林:磷酸可待因=25:1)(mg/kg) 痛反应时间超过60S的动物数(只) 镇痛有效率(%) 表4.复方混合物对小鼠热板致痛反应的镇痛作用(n=20) 对比 表1. 表2. 表3. 若复方混合物的镇痛有效率大于阿司匹林、磷酸可待因的镇痛有效率,则两种药物之间具有协同镇痛作用。 若复方混合物的镇痛有效率小于阿司匹林、磷酸可待因的镇痛有效率,则两种药物之间具有拮抗镇痛作用。 若复方混合物的镇痛有效率等于阿司匹林、磷酸可待因的镇痛有效率,则两种药物之间无相互作用。 在对应 药物剂量 比条件下, 比较镇痛 有效率。 结果分析 受试药品名 ED50(mg/kg) 95%可倍限(mg/kg) 阿司匹林 磷酸可待因 复方混合物 生理盐水 表5.阿司匹林、磷酸可待因以及两者的复方对小鼠热板致痛反应的镇痛ED50 ED50:半数有效量。在量反应中指能引起50%最大反应强度的药量,在质反应中指引起50%实验对象出现阳性反应时的药量。 LD50:半数惊厥量或半数致死量。 (药物的ED50越小, LD50越大说明药物越安全。) 95%可倍限:在此剂量范围内95%的实验对象出现阳性反应。 注意 事项 选择雌性小鼠以避免雄性小鼠阴囊与Woolfe 热板接触而影响实验结果 为尽量减少个体差异,应事先筛选痛阈小于30秒的小鼠作为实验鼠 实验室室温应在15℃左右,Woolfe热板温度55℃左右;痛阈超过60秒的小鼠应立即取出以免烫伤 各组给药后观察痛阈的时间要一致 吴紫薇 可行性分析 罗欣然 1.本实验操作简单,不需要过多的专业操作技术;通过舔后足、扭体反应和痛反应时间作为效应指标,直观
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