高中生物选修3优质课件4：1.2 基因工程的基本操作程序.pptxVIP

专题1 基因工程1.2 基因工程的基本操作程序基因工程培育抗虫棉苏云金芽孢杆菌（有抗虫特性）提取目的基因的获得抗虫基因基因表达载体的构建与运载体DNA拼接重组质粒（重组DNA分子）导入将目的基因导入受体细胞普通棉花植株目的基因的检测与鉴定抗虫性鉴定抗虫棉花植株一、目的基因的获取1.目的基因（外源基因）：所感兴趣的基因 目前被广泛提取使用的目的基因有：苏云金杆菌抗虫基因、植物抗病基因（抗病毒、抗细菌)、人胰岛素基因等。供体生物细胞取出DNA用限制酶剪去多余部分目的基因2、获得目的基因的方法已知序列人工合成利用PCR技术扩增未知序列从基因文库获得序列已知（1）人工合成当基因比较小、核苷酸序列已知或蛋白质的氨基酸序列可以测得时①化学合成法：蛋白质的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列结构基因的核苷酸序列目的基因推测推测化学合成② 逆转录法：目的基因的mRNA逆转录（逆转录酶）单链DNA (cDNA）合成（DNA聚合酶）双链DNA (即目的基因)（2）利用PCR技术扩增目的基因PCR (polymerase chain reaction)——聚合酶链式反应根据DNA双链复制的基本原理，模拟体内复制过程，在生物体外复制特定DNA片段的技术过程PCR（体外）体内双链DNA双链DNA高温变性（加热至90～95 ℃ ）解旋（解旋酶）单链DNA单链DNA低温退火（复性）（冷却至55～60 ℃ ）合成