OLYMPUS钠、钾、氯测定作业指导书.doc

OLYMPUS钠、钾、氯测定作业指导书 1. 实验原理[1] 传统的血液样品的离子检测方法是用火焰光度学方法，样品被已知离子（通常为锂离子或铯离子）浓度的溶液稀释，雾化并通过火焰成为离子态。这些离子象不同频率的光子一样稀放能量，光的强度与样品中的离子浓度有关。新发现的钠离子选择性玻璃、和选择性吸收钾和氯的有机化合物使得探测器可以直接接触生物体液进行测量，这些感受器即所谓离子选择性电极。 OLYMPUS 电解质分析仪使用离子选择性电极技术检测生物体液中的钠、钾、氯离子浓度。钠、钾电极采用对钠、钾离子敏感的膜电极；氯电极采用分子机制的PVC膜，仅对氯离子敏感。电极电位可与内参比电极产生的稳定电位比较而测得。离子选择性电极使得电位随样品的离子浓度的改变而改变，变化的电位与离子浓度呈对数关系，以能斯特方程表示： RT㏑（γC） E＝E0＋—————— NF 其中：E＝在样品溶液中的电极电位 E＝在标准状态下的电极电位 RT/nF＝一个与电极反应值有关的常量 ㏑＝取自然对数 r＝溶液中的离子活度 c＝溶液中的离子浓度 检测时利用了比较法。首先，加入样品，再加入稀释液，混匀后吸进装载电极的分析单元中，测量电位，然后加入标准液测量电位，测量电位，二者的差与样品中钠、钾、氯离子浓度和它们在标准液中的浓度之比存在对数关系，因已知电位与标准液中钠、钾、氯离子浓度的关系，计算机可据能斯特方程计算出样品中钠、钾、氯离子浓度。 2. 标本采集[2，3] 2.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。 2.2 类型：血清、肝素锂抗凝血浆或尿液。 3. 标本采集、处理与贮存：应尽量避免标本溶血或严重脂血。溶血标本，红细胞中的钾会释放到血清或血浆中，造成假性钾便高。因此血清、肝素锂抗凝血浆标本应及时离心分离血清或血浆并避免残留红细胞。严重脂血的标本，会造成假性低、钠钾血症，应通过超速离心消除脂血的影响。血清或血浆标本的稳定性：在2～25℃贮存，氯稳定7天，钾6周，钠2周。24小时尿液标本不添加防腐剂，混浊尿应离心后吸取上清液，严禁酸化尿液。尿标本的稳定性：在2～25℃贮存，氯稳定7天[6]，钾在2～8℃贮存稳定2个月，在15～25℃贮存稳定45天[4]，钠在2～25℃贮存稳定45天[4]。 4. 标本运输：室温条件下运输 5. 标本拒收标准：细菌污染、溶血、严重脂血的不能做测定。 6. 实验材料： 6.1 日本OLYMPUS ISE试剂与标准液 货号 试剂名称 规格 成分 浓度 （单位：mol/L） 试剂稳定性 66320 ISE缓冲液 4×2000ml Triethanolamine 防腐剂 0.1 适量 2个月 66319 ISE中值 标准液 4×2000ml Na K Cl 防腐剂 4.3 0.13 3.1 适量 1个月 66318 ISE参比液 4×1000ml 氯化钾 防腐剂 1.0 适量 2个月 66317 ISE低值血清标准液 4×100ml Na K Cl 防腐剂 130 3.5 85 适量 90天 66316 ISE高值血清标准液 4×100ml Na K Cl 防腐剂 160 6 120 适量 90天 66315 ISE低/高值尿标准液 4×100ml Na K Cl 防腐剂 低（50）高（200） 低（10）高（100） 低（50）高（180） 适量 90天 66314 ISE内参比液 2×25ml 氯化钾 氯化银 防腐剂 3.3 饱和 适量 90天 66317 ISE Na/K选择性监测液 2×25ml Na 防腐剂 150 适量 90天 6.1.1 试剂组成：见上表。 6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 6.1.3 试剂稳定性与贮存 货号为66314的试剂应保存于15～25℃，若开启使用，在15～25℃保存可稳定90天。其它试剂未开启前在2～25℃保存可稳定至失效期；一旦开启在2～25℃保存其有效期见上表。 6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染或过失效期不能继续使用。 6.1.5 注意事项：货号为66317、66316、66315、66314和66313的试剂在每次使用后均应立即盖好盖子。ISE内参比液在保存期间可有部分沉淀释出，这不会影响试剂性能，但在使用前应充分混匀试剂。试剂中含防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。 6.2 校准品：使用OLYMPUS公司提供的ISE低/高值血清标准液或ISE低/高值尿标准液对自动分析仪进行校准，每天开机前校准或在下列情况下校准：试剂批号更换、质控数值明显漂移或失控、更换电极、主要的预防性保养后或关键部件更换后。 6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件 7. 仪器：奥林巴斯AU640 ISE 分析仪 8. 操