理发用具微生物检测方法大肠杆菌测定.doc

理发用具微生物检测方法 大肠杆菌测定 GB/T 18204.6-2000 1 范围 本标准规定了理发用具大肠菌群的检验方法。 本标准适用于理发用具的大肠菌群的检验。 2 定义 大肠菌群：指一群在370.24 h培养能发酵乳糖、产酸、产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。 3 仪器、培养基和试荆 见GB/T 18204.3- 2000中第3章 见GB/T 18204. 3- 2000中第4章 4 操作步骤 4.1 采样应在无菌操作下进行。将蘸有无菌生理盐水的无菌棉拭子在推子前部上下均匀各涂抹三次，或在使用的刀刃、剪刃的两侧各涂抹一次采样将采样后的棉拭子剪去手接触部分，放人10 mL灭菌生理盐水中，充分振摇，取5 mL放人双料乳糖胆盐发酵管中，置36℃士1℃温箱培养24 h，如乳糖胆盐发酵管不产气，则可报告大肠菌群阴性，如有产酸、产气者，则进行分离培养。 4.2 分离培养:将产酸、产气的发酵管划线接种在伊红美兰琼脂平板上，置37℃温箱培养18^24 h，观察菌落形态，做革兰氏染色和证实试验。典型的大肠菌落为黑紫色或红紫色，具有金属光泽。 4.3 证实试验:挑取可疑大肠杆菌菌落1-2个进行革兰氏染色镜检，同时接种乳糖发酵管于36℃士1℃培养24h观察产气情况。 5 结果报告 如乳糖管最终产酸、产气、革兰氏染色为阴性的无芽胞杆菌，即可报告大肠菌群阳性。