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基因工程复习题 一、名词解释： （10～20%） 基因工程 基因工程工具酶 限制性内切酶 限制性内切酶的 活性 引物 扩增平台期 芯片 基因组文库 文库 转化 限制与修饰系 统 原位杂交： 将细胞或组织的核酸固定保持在原来的位置上， 然后用探 针与之杂交的一种核酸分子杂交技术， 该方法可较好地反映目的基因 在细胞或组织中的分布和表达变化。 粘性末端：双链被限制性内切酶切割后， 形成的两条链错开几个碱基， 而不是平齐的末端。 印迹杂交：将进行变性电泳后， 再转移到固相支持物上与探针杂交的 一种核酸分子杂交技术，可用于检测目的基因的转录水平。 转位：一个或一组基因片段从基因组的一个位置转移到另一个位置的 现象。 基因工程：在体外，用酶学方法将各种来源的与载体连接成为重组， 继而通过转化和筛选得到含有目的基因的宿主细胞， 最后进行扩增得 到大量相同重组分子的过程称为基因工程， 又称基因克隆、 克隆和重 组等。 目的基因：基因工程中，那些被感兴趣的、被选作研究对象的基因就 叫作目的基因。 连接器：人工合成的一段含有某些酶切位点寡核苷酸片段， 连接到目 的基因的两端，便于基因重组中的切割和连接。 转化：受体细胞被导入外源并使其生物性状发生改变的过程。 停滞效应：中后期，随着目的扩展产物逐渐积累，酶的催化反应趋于 饱和，扩增产物的增加减慢，进入相对稳定状态，即为停滞效应，又 称平台期。 逆转录：以为原始模板进行的反应。 : 即聚合酶链式反应。在模板，引物， 4 种和耐热聚合酶存在的条件 下，特异性地扩增位于两段已知序列之间的区段地酶促合成反应。 α- 互补（α）：指在 M13噬菌体或质粒序列中，插入了启动子 - 操纵 子基因序列以及编码 β- 半乳糖苷酶端 145 个氨基酸的核苷酸序列 （又称 α- 肽），该序列不能产生有活性的 β- 半乳糖苷酶。 感染（）特指以 λ 噬菌体、粘粒和真核细胞病毒为载体的重组分子， 1 / 17 在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒， 才能感染适当 的细胞，并在细胞内扩增。 其中，由噬菌体和细胞病毒介导的遗传信 息的转移过程又称为转导（） 。 47、转染 （）指真核细胞主动摄取或被动导入外源片段而获得新的表 型的过程。 二、填空题（ 20%） 1、片段重组连接的方法主要有 平端连接、粘端连接、同聚尾连接、 加接头连接 。 2、感受态细胞是指 具有摄取外源分子能力的细胞。 3、λ 噬菌体蛋白对重组体外包装时，包装长度为野生型 λ 的 75~105%。 5、反应体系含有耐热的聚合酶，化学合成的寡核苷酸引物，四种， 合适的缓冲液体系。 6、核酸探针包括： 探针；基因组探针；寡核苷酸探针和探针。 7、部分酶切可采取的措施有： (1)(2) (3) 等。 (1) 减少酶量； (2) 缩 短反应时间； (3) 增大反应体积 8、聚合酶 I 的大片段是用切割聚合酶 I 得到的分子量为 76 的大片段， 具有两种酶活性： (1) ； (2) 的活性。 枯草杆菌蛋白酶； (1)5-3