酶的生物改造.pptxVIP

酶的生物改造 ——酶的定向进化研究进展;介 绍 提 纲; 1、酶分子改造的方法;实例：木糖异构酶的定点突变改造;实例：木糖异构酶的定点突变改造; 2、生物自然进化的局限性; 基因工程技术使得人类快速筛选工业菌种成为可能，在几天和数月内即可完成；还可以让人类按照自己的意愿和需要改造菌种，甚至可以产生自然界中原本不存在的全新酶，以适应大工业生产的需要。;3、酶的定向进化技术;4、定向进化的原理;;二、酶定向进化的应用;酶定向进化的典型例子;β－内酰胺酶的活性提高了32,000倍； β－半乳糖苷酶的底物特异性提高了1000倍，且活性提高66倍； 天冬氨酸转氨酶对β－支链氧代氨基酸活性提高105倍且对缬氨酸的催化效率提高2.1×106倍等。;成功的例子;三、酶定向进化的基本过程;1、定向进化的方法;无性进化：易错PCR方法 ;无性进化：易错PCR方法 ;易错PCR方法实例 ;有性进化：DNA改组方法（1994，Stemmer);有性进化：DNA改组方法;有性进化：体外随机重组法（1998，Arnold);有性进化:交错延伸法（1997，Arnold);基因家族的同源重组;The Molecular Breeding directed molecular evolution process; 对一组同源蛋白质的氨基酸序列进行比较，以一 定的标准程序计算出各氨基