实验三细菌的致病性.ppt

实验三细菌的致病性 第一页 细 菌 的 致 病 作 用 细菌的毒力物质 侵袭力 毒 素 外 毒 素 内 毒 素 侵 袭 性 物 质 菌 体 结 构 第二页 细菌的侵袭力的构成 菌体表面结构 荚膜 、微荚膜及糖萼 菌毛或非菌毛粘附素 侵袭性物质 侵袭性蛋白及侵袭性酶类 第三页 细 菌 所 产 生 的 毒 素 外毒素： 内毒素： 第四页  ? ? 内毒素与外毒素的比较 种类 内毒素 外毒素 来源 革兰阴性菌 革兰阳性菌部及分革兰阴性菌 存在部位 细胞壁成分、细菌裂解释出 活菌分泌或细菌溶解散出 化学成分 脂多糖 蛋白质 稳定性 好、160℃ 2-4h 破坏 差、60-80℃ 30min 破坏 毒性作用 弱、各种内毒素作用大致相同，引起休克，发热，DIC等 强、对机体组织器官有选择性，引起特殊临床表现 抗原性 弱，能刺激机体形成抗体， 但无中和作用。 甲醛处理后不能形成类毒素 强，能刺激机体形成抗毒素， 经甲醛脱毒后能形成类毒素 第五页 细菌致病作用的实验内容 血浆凝固酶实验 内毒素发热反应及鲎试验 试管法 玻片法 第六页 血 浆 凝 固 酶 是致病性葡萄球菌产生的一种侵袭性物质 具有抗吞噬作用及血清中杀菌物质对细菌的杀灭作用 使感染局灶化 第七页 血浆凝固酶的种类及检测方法 游离血浆凝固酶 —— 试管法检测 结合血浆凝固酶 —— 玻片法检测 第八页 游离血浆凝固酶——试管法 材料与方法： 混　匀 ３７ ℃ ，１小时 对　照 兔血浆：０．２ｍｌ　　　　 肉　汤：０．１ｍｌ 实　　验 兔　血　浆：０．２ｍｌ　　　　 金葡菌菌液：０．１ｍｌ 第九页 内毒素的发热试验 试验动物：家兔 (正常体温范围 38.5-39.5 C) 菌液： 伤寒杆菌培养液 （加热处理，取0.5-1ml） 结果观察：注射前后肛温的变化 （前，后30min） 注意事项：肛温的测量 （体温计使用、肛门位置) 0 第十页 兔耳缘静脉注射 　兔耳部血管分布清晰。兔耳中央为动脉，耳外缘为静脉。内缘静脉深不易固定，故不用。外缘静脉表浅易固定，常用。先拔去注射部位的被毛，用手指弹动或轻揉兔耳，使静脉充盈，左手食指和中指夹住静脉的近端，拇指绷紧静脉的远端，无名指及小指垫在下面，右手持注射器连6号针头尽量从静脉的远端刺入，移动拇指于针头上以固定针头，放开食指和中指，将药液注入，然后拔出针头，用手压迫针眼片刻。 第十一页 兔耳缘静脉注射 第十二页 操作 内毒素发热反应 鲎试验 准备 上次实验结果观察 第十三页 内毒素检测方法——鲎试验 试剂：鲎试剂 内毒素、生理盐水 试验结果观察： 鲎试验(+)：出现凝固 第十四页 外 毒 素 的 毒 性 作 用 实验试剂：破伤风梭菌外毒素 破伤风抗毒素 实验动物：小白鼠 试验结果观察： 小鼠强直性痉挛 第十五页 药 敏 试 验 （抗生素敏感试验） 第十六页 目的要求: 1、了解抗生素敏感试验的操作方法 2、初步作为抗生素敏感试验结果的 判断 3、了解常用抗生素的抗菌谱 第十七页 纸片法 材料： 1、菌种：葡萄球菌、大肠杆菌、痢疾 杆菌、绿脓杆菌 2、培养基：普通琼脂平板 3、抗生素滤纸片：每片含药量：青霉 素1单位，其它抗生素为10微克 第十八页 绿脓杆菌 第十九页 葡萄球菌 第二十页 大肠杆菌 第二十一页 * * 很重要内nei；类lei 肺炎球菌荚膜观察,该项本次实验没做。 原理：金葡菌产生的血浆凝固酶能使血浆中可溶性的纤维蛋白原转化为纤维蛋白，而纤维蛋白是不溶的，因此血浆凝固。 　效果观察：将试管倾斜，观察液体是否凝固 　　想知道金黄色葡萄球菌是否产生了游离血浆凝固酶，我们就取一些金黄色葡萄球菌菌液检测，（兔　血　浆　——　底　物，肉　汤　——　对　照） 　　具体的操作：每两个同学一组，每组有两管加入０．２ｍｌ兔血浆的试管。（预先放置在准备台上，窗户边！） 　　　　　　　　大家分别往一管中加入０．１ｍｌ金葡菌菌液，另一管中加入０．１ｍ