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临床微生物实验室细菌分离接种技术的研究进展 作者： 上海市临床检验中心 王敬华 , 葛平 , 陈蓉 , 徐蓉 , 刘学杰 近年来 , 随着现代医学和科学技术的发展 , 新的科技成果正 不断地被迅速应用于医学科学研究和临床实践。其中 , 临床 微生物检验技术也得到快速发展 , 各种非培养快速诊断方法 的建立缩短了检验时间 [1, 2] 。但作为循证医学的直接证据 , 病原菌分离培养仍然是诊断感染性疾病的金标准 , 也是进行 体外药物敏感性试验、合理选择抗菌药物进行个体化抗感染 治疗的主要手段。作为细菌培养和鉴定的前期基础 , 微生物 标本接种技术得到一定发展 , 出现了商品化的自动化、半自 动化接种仪。目前在国内临床微生物实验室中 , 以接种环手 工分区划线接种标本方法为主 , 兼有自动化、半自动化标本 接种方法共存 , 尚难以进行统一操作和标准化。为提高检验 质量 , 开展有效的标本接种质量控制 , 我们就临床微生物实 验室细菌分离接种技术的发展现状和研究进展进行综述。一、 目前微生物标本接种的经典方法 利用接种环分区划线以获取单个菌落是经典的细菌接种方 法 , 目前仍然被国内外临床实验室广泛采用。但该方法也存 在一些弊端。首先 , 该方法对个人操作水平要求较高 , 不仅 必须做到无菌操作 , 而且要通过严格培训和长期操作实践 , 才能获得理想的分离效果 ; 其次 , 人工接种方法总体效率低 , 并受操作者个人水平和接种习惯的影响 , 主观影响因素较多 , 重复性差 ; 另外 , 在整个接种过程中 , 标本完全暴露于空气 中, 操作者与标本近距离接触 , 自身健康受到威胁。 总之 , 这 种经典的细菌接种方法工作效率低 , 难以进行标准化和实施 质量控制 , 无法满足现代化的实验室对自动化、标准化的要 求。 二、自动化快速接种技术发展现状标本接种自动化和标准化 是临床微生物实验室提高检验质量、开展质量控制的主要研 究和发展的方向之一。 19 世纪 70 年代 , 美国已经开始了自 动化微生物接种仪的研究。 1973 年 , 美国埃德坎贝尔博士与 美国食品药品管理局研究员发明了螺旋接种方法自动计算 细菌的数量 , 并最早于 1977 年获得螺旋接种仪的发明专利 , 于 1979 年与 Interscience 的创始人 Fracois/Jalenque 共同 研发生产了第一代螺旋细菌接种仪 , 主要用于食品药品中微 生物检验。 1992 年 , 他们重新校正了 Spiral 螺旋接种方法 , 并申请了专利 , 成为第一代接种仪接种原理的理论基础。