体外抗原抗体反应概述 PPT.pptxVIP

体外抗原抗体反应概述;抗原抗体反应:是指抗原与相应抗体的特异性结合反应;第一节 抗原抗体反应的原理; 抗原抗体结合反应是抗原决定簇和抗体分子超变区之间的相互作用,是一种分子表面的特异的可逆的弱结合力(只能在极短距离内才能发生效应)。 抗原抗体结合反应的条件: ①抗原与抗体间的特定部位的空间结构必须相互吻合,具有互补性(先决条件); ②抗原决定簇与抗体超变区必须紧密接触,才能有足够的结合力,使抗原抗体分子结合在一起。 ;;1、静电引力; 二、范德华引力; 概念:供氢体上的氢原子与受氢体原子间的引力。 ;四、疏水作用力(疏水键);静电引力:异性相吸 (electrostatic forces) 范德华引力:作用最小 (van der Waals interactions) 氢键:最具特异性 (hydrogen bond ) 疏水作用力:作用最大 (hydrophobic interactions) ;; 结合力的大小;;亲和常数(K):;;;;;2、决定因素: 由抗原决定簇和抗体分子超??区之间空间结构的互补性决定的。;概念:两种不同的抗原分子具有部分相同或类似结构的抗原表位,可与相互相应的抗血清发生反应。;三、比例性(proportionality);网格学说(图); Ab/Ag过剩 过剩方的结合价得不到饱和,大多数游离存在,只形成小分子复合物(不可见)。;最适比(optimal ratio):是指形成沉淀物最多,上清液清楚,几乎无游离抗原或抗体的抗原抗体浓度比。 等价带(equivalencezone):形成沉淀物最多的抗原与抗体分子比例合适的范围。 带现象:在等价带前后,由于抗体和抗原过量,形成的沉淀物少,上清液中可测出游离的抗体或抗原的现象。 前带(prozone)抗体过量时称为。 后代(postzone)抗原过量时称为。;在抗原抗体反应中,抗体(或抗原)与一定量的对应物结合出现可见反应所需的最小量称为效价(或滴度),一般以最高稀释倍数表示,正好是稀释度的倒数。; 三、可逆性(reversibility);4、决定抗原抗体解离的因素;四、时期性;第三节 抗原抗体反应影响因素;抗体是血清学反应中的关键因素,对反应的影响表现在以下三个方面: (1)来源:来自不同动物的免疫血清,其反应性有差异。家兔等大多数动物的免疫血清具有较宽的等价带,通常在抗原过量时才易出现可溶性免疫复合物;马等大动物和人的免疫血清等价带较窄,少量的抗原或抗体过剩,均可形成可溶性免疫复合物、;(2)特异性与亲和力:;(3)浓度: 抗体的浓度往往是与抗原相对而言。合适的浓度才出现明显的反应现象。因此许多试验应进行抗体预滴定,找出最适反应浓度。 ;电解质: 生理盐水或缓冲液 酸碱度: pH6～pH8 温 度: 15℃～40℃,37℃最适 ;(一)电解质 ; 通常在血清学试验中,以8、5g/LNaCl溶液作为抗原抗体的稀释液及反应液,其中Na+和Cl-可分别中和胶体颗粒上的电荷,使胶体颗粒的电势下降,形成可见的沉淀物或凝集物。但假如电解质浓度过高,则会出现非特异性蛋白质沉淀,即盐析。 补体参与的溶细胞反应,除需要等渗的NaCl溶液外,还需适虽的Mg2+和Ca2+离子参与。 ;;;感谢您的聆听！