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血凝实验真菌检查法 第一页，共25页。 1、血凝试验 （1份/人） 2、真菌检查法（1份/人） 3、真菌大小培养观察 4、观察梅毒螺旋体形态（示教） 5、性病防治（录像） 实验内容 第二页，共25页。 掌握真菌检查实验原理及方法 掌握血凝实验原理及方法 熟悉螺旋体及支原体形态学观察方法 二、教学目的及教学要求 第三页，共25页。 （一）、病毒血凝实验 原理：某些病毒由于表面有由糖蛋白组成的血凝素（HA ） ，在一定条件下，能与某些动物或人的红细胞表面的糖蛋白受体结合产生凝集，称为红细胞凝集试验或血凝试验，能形成血凝现象的病毒有：流感病毒、腮腺炎病毒、麻疹病毒、乙脑病毒等。 第四页，共25页。 操作步骤 试管号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 生理盐水（ml） 1:10 病毒液（ml） 0.5 0.25 + 0.25 0.25 + 0.25 0.25 + 0.25 0.25 + 0.25 0.25 + 0.25 0.25 + 0.25 0.25 + 0.25 0.25 -- 病毒稀释度 1∶10 1∶20 1∶40 1∶80 1∶160 1∶320 1∶640 1:1280 对照 0.5%鸡红细胞悬液（ml） 每管0.25ml? 摇匀后，静置室温30-60min ,观察结果 弃去0.25ml *观察结果时要轻拿、勿摇动 第五页，共25页。 血凝试验结果判定 结果观察： 凝集特别显著：“＋＋＋＋” 凝集现象次之：“＋＋＋” 凝集清楚可见：“＋＋” 稍显凝集者： “＋” 血凝效价：呈“＋＋”凝集时的最高稀释度为最终滴度。 第六页，共25页。 意 义 检查病毒的存在。 滴定病毒的血凝效价，采用一定的病毒量进行其他实验，通常采用4个血凝单位。 第七页，共25页。 （二）、真菌检查法（1份/人） 概念：真菌是一大类具有细胞壁和典型细胞核不含叶绿素，不分根、茎、叶的真核细胞型微生物。 分类：单细胞和多细胞 第八页，共25页。 单细胞真菌：呈圆形或卵圆形常见于酵母菌，类酵母菌以出芽方式繁殖。 卵圆形 G+，着色不一 可见假菌丝 白假丝酵母 第九页，共25页。 多细胞真菌形态 菌丝 孢子 第十页，共25页。 真菌基本形态 单细胞真菌：白假丝酵母，卵圆形，革兰染色阳性，着色不一，可见假菌丝。 多细胞真菌：丝状菌或霉菌，有菌丝和孢子。 烟曲霉 白假丝 酵母 第十一页，共25页。 菌落特征: 酵母型真菌 类酵母型真菌 丝状菌落 单细胞 多细胞 第十二页，共25页。 酵母型菌落 类酵母型菌落 第十三页，共25页。 酵母型菌落 类酵母型菌落 第十四页，共25页。 真菌的菌落 白假丝酵母：菌落圆形，较大，白色菌落底层有假菌丝 多细胞真菌：观察气生菌丝，营养菌丝，表面隆起，浅沟及菌落基底颜色。 白假丝酵母 (血平板) 黄曲霉 第十五页，共25页。 1、营养要求不高，常用沙保弱培养基培养。 2、生长缓慢，培养1—4周才出现典型菌落。 3、培养温度为22--28℃，但某些深部真菌最 适生长温度为37℃。 4、最适酸碱度为PH4.0—6.0。 5、湿度要求较高。 真菌培养特性 第十六页，共25页。 原理 直接涂片检查 用显微镜直接检查标本中有无菌丝及孢子的存在，对皮肤丝状菌的感染可作初步诊断，本法简单迅速易行。 第十七页，共25页。 材 料 标本:脚皮等 试剂:10％KOH 器具:玻片、镊子、酒精灯等 第十八页，共25页。 遵义医学院微生物教研室 * 遵义医学院微生物教研室 *