蛋白质的分离和纯化.pptVIP

* 蛋白质的分离和纯化 第一页，共42页。 一、蛋白质的分离 2.根据蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等等，可以用来分离不同种类的蛋白质。 Q:下列蛋白质如何提取？ 酸性蛋白质； 水溶性蛋白质； 脂溶性蛋白质； 偏碱性溶液 透析液（中性缓冲液） 有机溶剂 原理 1.根据细胞的结构特点，选择不同的破碎细胞的方法（如研磨法、超声波法、酶解法等），使各种蛋白质释放出来。 第二页，共42页。 一、蛋白质的分离 1.抽提方法： （1）酸性蛋白质： （2）水溶性蛋白质： （3）脂溶性蛋白质： 偏碱性溶液 透析液（中性缓冲液） 有机溶剂 第三页，共42页。 二、常用的分离方法 1.离心沉降法 2.薄膜透析法 3.凝胶色谱法 4.电泳法 第四页，共42页。 1.离心沉降法 原理：通过控制离心速率，使得分子大小、密度不同的物质发生分层沉降，从而分离出不同种类蛋白质。 离心时相对分子质量大的物质先沉淀。 第五页，共42页。 2.薄膜透析法 （1）原理：利用蛋白质分子不能透过半透膜的特性，可将蛋白质与其他小分子化合物分离开。 （2）方法：将待分离的蛋白质溶液装入用半透膜制成的透析袋内，再将透析袋放入透析液中便可进行透析。 半透膜能使小分子自由进出，而大分子保留在袋内。