蛋白质组学及其研究方法.pptVIP

图像采集 斑点检测 背景消减 获得蛋白质相关信息 图像内及图像间的比较 2-DE图像分析软件包操作过程： 第二十九页，共46页。 2-DE技术的优缺点 优点：可以同时直观显示数千个蛋白质点； 缺点： 极酸、极碱性蛋白质，疏水性蛋白质，极大蛋白质、极小蛋白质以及低丰度蛋白质用此种技术难于有效分离； 胶内酶解过程费时、费力，难于与质谱联用实现自动化； 丙烯酰胺有神经毒作用。 第三十页，共46页。 新型非凝胶技术 液相色谱法(liquid chromatography，LC) 毛细管电泳(capillary electrophoresis，CE) 液质联用技术（LC-MS/MS） 蛋白质混合物直接通过液相色谱分离以代替2-DE的分离，然后进入MS系统获得肽段分子量，再通过串联MS技术，得到部分序列信息，最后通过计算机联网查询、鉴定蛋白质。 多维色谱技术（LC/LC-MS/MS） 多维蛋白质鉴定技术 第三十一页，共46页。 （三）蛋白质组研究中的样品分析鉴定 传统方法：蛋白质微量测序 氨基酸组成分析 新型蛋白质鉴定技术 —— 质谱（MS）法 基本原理：样品分子离子化后，根据离子间质荷比 （m/z）的差异来分离并确定样品的分子量。 第三十二页，共46页。 主要质谱类型 基质辅助激光解吸/电离