化学毒物的生殖毒性食品毒理学.pptVIP

化学毒物的生殖毒性食品毒理学;第一节 雄性生殖毒性;三、雄性生殖毒性检测方法;;第二节 雌性生殖毒性;;第三节 致畸试验;第三节 致畸试验;一、基础概念 ;畸形、畸胎和致畸物 畸形(malformation):器官形态异常。 畸胎(terate):含有畸形胚胎或胎仔。 致畸物或致畸原(teratogen):凡在一定剂量下, 能经过母体对胚胎或胎儿正常发育过程造成干扰, 使子代出生后含有畸形化合物。 致畸试验:评定外源化学物是否含有致畸作用试验。 ;畸形与变异 在胚胎或胎儿出现器官形态结构异常称为畸形。 机体形态结构或生理功效, 在同一物种子代与亲代之间或子代个体之间, 有时出现不完全相同现象, 即为变异。 ;二、发育毒性机制1、干扰基因表示 5、干扰细胞-细胞交互作用2、基因突变与染色体畸变 6、经过胎盘毒性引发发育毒理3损伤细胞和分子水平翻译 7、干扰母体稳态4、细胞凋亡 8、内分泌干扰作用三、发育毒性表现1、生长迟缓。2、致畸作用 3、功效不全或异常4、胚胎或胎仔致死作用;四、发育毒性三阶段试验;五、外源化学物发育毒性评价 ;1、动物选择: 致畸试验动物选择, 除参考毒性试验中选择动物通常标准, 即食性和对受试物代谢过程与人类靠近, 体型小, 驯服, 轻易喂养和繁殖及价廉外, 还应尤其注意妊娠过程较短、每窝产仔数较多和胎盘结构及厚度与人类靠近等特点。 2、剂量分组 通常应优异行预试, 目是找出引发母体中毒剂量。最少设3个剂量组, 另设对照组。标准上最高剂量组, 能够引发母体轻度中毒, 即进食量降低、体重减轻、死亡不超出10%。最低剂量组不应观察到任何中毒症状; 中间剂量组能够许可母体出现一些极轻微中毒症状。其剂量与高剂量和低剂量成等比级数关系。 通常最高剂量不超出LD501/5～1/3, 低剂量可为1／100～1／30。;3 、动物交配处理 每组动物大鼠或小鼠为12～20只, 家兔8～12只, 狗等大动物3～4只。 将性成熟雌雄动物按雌雄l: 1或2: 1百分比同笼交配。每日将已确定受孕雌鼠随机分入各剂量组和对照组。出现阴栓或精子之日即为受孕0???, 也有些人作为第1日。 因为致畸作用有极为明确敏感期, 应正确掌握动物接触受试物时间, 必需在器官发生期。 ;4、胎仔检验 自然分娩前1-2日将受孕动物处死, 剖腹取出子宫及活产胎仔, 并另行统计死胎及吸收胎。通常大鼠在受孕后第19-20天, 小鼠第18-19天, 家兔在第29天。 下列几方面进行畸形检验: 外观畸形肉眼检验, 比如露脑; 肉眼检验内脏及软组织畸形, 比如腭裂; 骨骼畸形检验, 比如颅顶骨缺损, 分叉肋等。畸形检验只限活产胎仔。 ;5、数据处理 活产幼仔平均畸形出现数:即依据出现畸形总数, 计算每个活产幼仔出现畸形平均数。 畸形出现率:即作为畸胎幼仔在活产幼仔总数中所占百分率。 母体畸胎出现率 :即出现畸形胎仔母体在妊娠母体总数中所占百分率 6、 结果评定 致畸指数越大, 致畸作用越强, 反之越小。通常认为致畸指数10以下为不致畸, 10－100为致畸, 100以上为强致畸。 母体毒性与发育毒性比值, 即母体最低损害作用剂量（A)与胎仔最低损害作用剂量（D)之比, 比值越大, 危险性越高。;7、致畸物以及发育毒性作用物危害度评价;确定受试物是否含有致畸作用时需注意以下几点: 任何结果必需经过统计计算方法进行剂量组与对照组对比; 必需含有??计学意义才能认为是阳性结果。 应该掌握所用试验动物品系自然畸形发生率。 致畸作用中动物物种和品系差异较为显著, 所以要求在两种动物进行试验。因为物种差异, 对动物不含有致畸作用外源化学物对人是否致畸问题, 应格外认真对待。;发育毒性替换试验 大鼠全胚胎培养 胚胎细胞微团培养 小鼠胚胎干细胞试验 发育毒性体内预筛试验(C .K.试验) ;第四节 繁殖试验;试验方法标准 受试动物: 性成熟大鼠、小鼠或家兔 剂量分组:通常设置三个剂量组（最少两个剂量组）和一个对照组 染毒路径:动物接触受试物方法应参考人类实际接触路径 动物数:每组雌雄各16到20只, 或雌16到20只, 雄8到10只 ;试验方法 : 三代两窝 ; 两代一窝(和一代一窝)生殖试验 ;观察指标: 受孕率（％）:反应雌性动物生育能力以及雌性动物受孕情况 正常分娩率（％）:反应雌性动物妊娠过程是否受到影响; 幼仔出生存活率（％）: