林业生物技术课件7.基因工程常用载体.pptVIP

林业生物技术课件7.基因工程常用载体.ppt

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林业生物技术课件7.基因工程常用载体;思 考 讨 论; 将外源DNA或基因携带入寄主细胞(host cell)的工具称为载体。;载体具备的特点;1、质粒载体;1、质粒载体;OC;1、质粒载体;1、质粒载体;1、质粒载体;1、质粒载体;1、质粒载体;1、质粒载体;1、质粒载体;1、质粒载体;1、质粒载体;1、质粒载体;1、质粒载体;1、质粒载体;② pUC18/19 2686bp 18:L08752 19:X02514 来自pBR322 LacZ’(MCS)来自M13mp18/19,MCS(10个位点)、 α -互补 用途: cloning expression:利用lacZ promotor sequencing:引物位置/引物序列;2、 λ噬菌体载体;2、 λ噬菌体载体;2、 λ噬菌体载体;2、 λ噬菌体载体;2、 λ噬菌体载体;2、 λ噬菌体载体;2、 λ噬菌体载体;2、 λ噬菌体载体;2、 λ噬菌体载体;2、 λ噬菌体载体;2、 λ噬菌体载体;2、 λ噬菌体载体;λ噬菌体电镜照片;2、 λ噬菌体载体;2、 λ噬菌体载体;2、 λ噬菌体载体;2、 λ噬菌体载体;2、 λ噬菌体载体;2、 λ噬菌体载体;2、 λ噬菌体载体;2、 λ噬菌体载体;2、 λ噬菌体载体;2、 λ噬菌体载体;2、 λ噬菌体载体;3、单链丝状噬菌体载体; 图中标出了 基因的大体位置。M13噬菌体基因组(+)DNA按基因Ⅱ到基因Ⅳ的方向转录形成(-)DNA,此即为M13噬菌体基因组的编码链;3、单链丝状噬菌体载体;3、单链丝状噬菌体载体;3、单链丝状噬菌体载体; (a)感染性单链(+)DNA在寄主酶的作用下转变成双链的RF DNA; ( b)RF DNA按θ形式进行若干复制循环; (c) RF DNA的负链转录成M13的mRNA; (d)M13基因Ⅱ编码蛋白质作用于 RF DNA正链的特定位点,切割形成切口; (e)复制叉沿负链模板移动,不断合成子代(+)DNA; (f)M13基因 Ⅱ蛋白质切下完整的子代(+)DNA,并进行环化; (g)继续合成子代(+)DNA;3、单链丝状噬菌体载体;3、单链丝状噬菌体载体;3、单链丝状噬菌体载体;3、单链丝状噬菌体载体;(a)无辅助噬菌体时pUC118/pUC119的复制;4、粘 粒;4、粘 粒;应用柯斯质粒基因克隆;4、粘 粒;4、粘 粒;4、粘 粒;4、粘 粒;5、其它载体;复制必须成分;5、其它载体;5、其它载体;5、其它载体;5、其它载体;单链丝状噬菌体载体(M13噬菌体载体、噬菌粒??

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