专题三课题一菊花的组织培养.ppt

2．配制培养基： 分装到锥形瓶中，每瓶分装50mL或100mL。 ① 配制培养液：配制1LMS培养基时，先将称好的琼 脂加入800mL蒸馏水，加热使琼脂熔化，然后加入 蔗糖30g，取配制好的大量元素、微量元素、有机 物和植物激素的母液，依次加入，加蒸馏水定容 至1000mL。 ② 调pH：5.8左右 ③培养基的分装: 由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因 此不必添加植物激素。 3．灭菌： 将分装好的培养基连同其他 器械一起进行高压蒸汽灭菌。 1．选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝。 （二）外植体消毒： 2．消毒： ① 流水冲洗： 菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右。 ② 酒精处理： 用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为70％的酒精中摇动2～3次，持续6～7s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗。 ③ 消毒液处理： 取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中1～2min，取出后，在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液。 (外植体：用于离体培养的植物器官或组织片段。) （三）接种： 接种前用体积分数为70％的酒精将工作台擦拭一遍，然后点燃酒精灯。因为污染的主要来源是空气中的细菌和孢子