发酵工艺过程控制.pptVIP

二、基质对发酵的影响及控制 基质即培养微生物的营养物质。 1. 碳源对发酵的影响及控制 迅速利用的碳源 缓慢利用的碳源 葡萄糖、蔗糖等 迅速参与代谢、合成菌体和产生能量，并产生分解产物，有利于菌体生长，但有的分解代谢产物对产物的合成可能产生阻遏作用； 多数为聚合物，淀粉等 为菌体缓慢利用，有利于延长代谢产物的合成，特别有利于延长抗生素的分泌期，也有许多微生物药物的发酵所采用。 在工业上，发酵培养基中常采用含迅速和缓慢利用的混合碳源。 第二十四页，共46页。 2. 氮源对发酵的影响及控制 迅速利用的氮源 缓慢利用的氮源 氨基（或铵）态氮的氨基酸（或硫酸铵等）、玉米浆 容易被菌体利用，促进菌体生长，但对某些代谢产物的合成特别是某些抗生素的合成产生调节作用，影响产量。 延长代谢产物的分泌期、提高产物的产量；但一次投入也容易促进菌体生长和养分过早耗尽，以致菌体过早衰老而自溶，缩短产物的分泌期。 发酵培养基一般选用含有快速和慢速利用的混合氮源，还要在发酵过程中补加氮源来控制浓度。 补加有机氮源，如酵母汁、玉米浆、尿素 补加无机氮源，如氨水或硫酸铵 第二十五页，共46页。 3. 磷酸盐对发酵的影响及控制 磷是微生物菌体生长繁殖所必需的成分，也是合成代谢产物所必需的。 微生物生长良好所允许的磷酸盐浓度为0.32～300mmol/L， 次级代谢产物合成良好所允许的最高平均浓度仅为1.0mmol/L. 磷酸盐浓度的控制，一般是在基础培养基中采用适当的浓度。 第二十六页，共46页。 第六节 补料的控制 补料分批培养（fed-batch culture，简称FBC），是指在分批培养过程中，间歇或连续地补加一种或多种成分的新鲜培养基的培养方法，是分批培养和连续培养之间的一种过渡培养方式，是一种控制发酵的好方法，现已广泛用于发酵工业。 第二十七页，共46页。 可以解除底物抑制、产物反馈抑制和分解代谢物的阻遏； 可以避免在分批发酵中因一次投料过多造成细胞大量生长所引起的影响，改善发酵流变学的性质； 可用作控制细胞质量的手段，以提高发芽孢子的比例； 可作为理论研究的手段，为自动控制和最优控制提供实验基础。 一、补料分批培养（FBC）的优点 第二十八页，共46页。 二、补料方式及控制 连续流加、不连续流加、多周期流加 快速流加、恒速流加、指数速率流加、变速流加 单组分流加、多组分流加 补料方式 流加操作控制系统 反馈控制 无反馈控制 直接方法 间接方法 以溶氧、pH值、呼吸商、排气中CO2分压及代谢产物浓度等作为控制参数 直接以限制性营养物浓度作为反馈参数，如控制氮源、碳源、C/N比等，由于目前缺乏能直接测量重要参数的传感器，因此直接方法的使用受到了限制。 第二十九页，共46页。 第七节 泡沫对发酵的影响及其控制 一、泡沫的形成及其对发酵的影响 在大多数微生物发酵过程中，通气、搅拌以及代谢气体的逸出，再加上培养基中糖、蛋白质、代谢物等表面活性剂的 存在，培养液中就形成了泡沫。 泡沫的多少与搅拌、通风、培养基性质有关。 蛋白质原料如蛋白胨、玉米浆、黄豆粉、酵母粉等是主要的发泡剂。 糊精含量多也引起泡沫的形成。 当发酵感染杂菌和噬菌体时，泡沫异常多。 第三十页，共46页。 少量泡沫的作用： 一定数量的泡沫是正常现象，可以增加气液接触面积，导致氧传递速率增加； 大量的泡沫引起许多负作用： 发酵罐的装料系数减少、氧传递系统减小； 增加了菌群的非均一性； 造成大量逃液，增加染菌机会； 严重时通气搅拌无法进行，菌体呼吸受到阻碍，导致代谢异常或菌体自溶； 消泡剂的添加将给提取工序带来困难。 第三十一页，共46页。 二、泡沫的消除 调整培养基中的成分（如少加或缓加易起泡的原料）或改变某些物理化学参数（如pH值、温度、通气和搅拌）或者改变发酵工艺（如采用分次投料）来控制，以减少泡沫形成的机会。 采用菌种选育的方法，筛选不产生流态泡沫的菌种，来消除起泡的内在因素。 采用机械消泡或消泡剂来消除已形成的泡沫。 第三十二页，共46页。 1. 机械消泡 物理消泡方法，利用机械强烈振动或压力变化而使泡沫破裂。 优点：节省原料，减少染菌机会。 缺点：消泡效果不理想，仅可作为消泡的辅助方法。 罐内消泡——靠罐内消泡桨转动打碎泡沫。 罐外消泡——将泡沫引出罐外，通过喷嘴的加速作用或离心力来消除泡沫。 第三十三页，共46页。 * 发酵工艺过程控制发酵工艺过程控制微生物发酵的生产水平不仅取决于生产菌种本身的性能，而且要赋以合适的环境条件才能使它的生产能力充分表达出来； 必须了解有关生产菌种对环境条件的要求，如培养基、培养温度、pH、氧的需求等，并深入了解生产菌在合成产物过程中的代谢调控机制以及可能的代谢途径，为设计合理的生产工艺提供