整套课件：分子生物学（华中科技大学）.ppt

基因表达 遗传信息从DNA→mRNA→蛋白质 中心法则 原核与真核基因表达比较 原核：调控系统主要为细胞高速生长或损伤修复服务，基因表达的开关经常是通过控制转录的起始来调节的。 真核：最显著特征是能在特定时间和特定的细胞中激活特定的基因，从而实现预定的、有序的、不可逆转的分化、发育过程，并使生物的组织和器官在一定的环境条件范围内保持正常功能。 真核生物基因调控分类 第一类是瞬时调控或称可逆性调控，包括某种底物或激素水平升降及细胞周期不同阶段中酶活性和浓度的调节。 第二类是发育调控或称不可逆调控，它决定了真核细胞生长、分化、发育的全部进程。 多层次 mRNA半衰期较长 个体发育复杂 受环境影响较小 真核基因表达调节的主要特点： 真核生物基因的特殊性 单顺反子 DNA与组蛋白和大量非组蛋白相结合，只有一小部分DNA是裸露的。 有一部分由几个或几十个碱基组成的DNA序列，在整个基因组中重复几百次甚至上百万次。 高等真核细胞DNA中很大部分不转录。 存在不被翻译的内含子。 DNA片段重排或增加某些基因的拷贝数。 转录调节区复杂，它们可能远离启动子达几百个甚至上千个碱基。它们与蛋白质结合，不直接影响启动子区对于RNA聚合酶的接受度，而是通过改变整个所控制基因5’上游区DNA构型来影响它与RNA聚合酶的结合能力。 转录、翻译有空间隔离。 mRNA经过复杂的成熟和剪接过程。 1.DNA水平上的基因表达调控 转录前调节 发生在染色体（DNA）水平上 丢失、扩增、重排、修饰和异质化 （1）染色体丢失 染色体数目减少和染色体片断的丢失。往往发生在一些低等真核生物个体发育的早期。 ? 染色体数目减少：——小麦瘿蚊受精卵的细胞核分裂时，当核第3次分裂后，形成极细胞质，保留了全套的染色体（2n=40），成为以后的生殖细胞。而在一般的细胞质中，染色体丢失了32条，只保留8条。将来分化为体细胞。极端例子：哺乳类的红细胞在成熟过程中，整个核都丢失了。 ? 染色体片断丢失：蛔虫、甲壳类的剑水蚤和原生动物的四膜虫。 （2）染色体扩增（基因扩增） 基因扩增是一种通过改变基因数量而调节基因表达产物的调控方式，是细胞短期内大量产生出某一基因拷贝从而适应特殊需要的一种手段。 rDNA的扩增：某些脊椎动物和昆虫的卵母细胞，为储备大量核糖体以供卵细胞受精后发育的需要，通常都要专一性地增加编码核糖体RNA的基因(rDNA)。 （3）基因重排 基因组序列的改变，如丢失一段特殊序列，或是一段序列从一个位点转移到另一位点，都属于基因重排，也是DNA重组的一种形式。 ? 表达基因发生切换，由表达一种基因转为基因重排会导致另一种基因。 ? 产生新的基因，以适合特殊的需要。 典型例子：大量抗体基因的产生。 in Prok. f Met—tRNA f met Met--tRNA metm Aminoacyl—tRNAaa in Euk. Met—tRNAI met Met--tRNA mete 翻译的起始 (细菌) 30S小亚基 模板mRNA fMet-tRNA fMet 起始因子（IF） GTP 50S大亚基 Mg2＋ 翻译起始分为3步 30S亚基与IF-1、IF-3结合，通过SD序列与mRNA模板结合 在IF-2和GTP帮助下， fMet-tRNA fMet进入小亚基P位点，反密码子与起始密码子配对 与50S大亚基结合，GTP水解，释放IF 翻译开始于mRNA与核糖体的结合 蛋白质合成中翻译的开始需要在mRNA上选择合适位置的起始密码AUG，这一过程是通过核糖体小亚基与mRNA的结合。 SD序列 原核生物的mRNA中核糖体的结合位点，即AUG起始密码子之前的多聚嘌呤序列AGGAGGU的部分或者全部，与16S rRNA的3‘末端互补。 Shine-Delgarno element SD序列的重要性 细菌毒素colecin E3 可通过核酸酶的活性特异的在16S rRNA3’端切下50个碱基左右的片段，使得核糖体小亚基中的16S rRNA失去了与mRNA上SD序列互补的可能，由此抑制了细菌蛋白质的合成。由于原核和真核生物在合成蛋白质机制上的差异， colecin E3 不影响真核生物的蛋白质合成。 真核与原核在合成上的共同点： （1）核糖体小亚基结合起始tRNA （2）mRNA上必须有合适的起始密码子 （3）大亚基必须与已经形成复合物的小亚基，起始tRNA、mRNA结合。 起始还需要非核糖体蛋白的起始因子（in