第六章 食品添加剂分析.pptVIP

食品中苏丹红染料的检测方法 高效液相色谱法(GB/T 19681—2005) 范围 本标准适用于食品中苏丹红染料的检测。 本标准规定了食品中苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红Ⅳ的高效液相色谱测定方法。 方法最低检测限：苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红Ⅳ均为 10 ug/kg 。 方法要点 样品经溶剂提取、固相萃取净化后，用反相高效液相色谱—紫外可见光检测器进行色谱分析，采用外标法定量。 * 谢谢欣赏 2021-5-18 样品处理 1. 红辣椒粉等粉状样品 称取1 g～5g〔准确至0.001g〕样品于三角瓶中，参加10mL～30mL正己烷，超声5min，过滤，用10mL正己烷洗涤残渣数次，至洗出液无色，合并正己烷液，用旋转蒸发仪浓缩至5mL以下，慢慢参加氧化铝层析柱中，为保证层析效果，在柱中保持正己烷液面为2mm左右时上样，在全程的层析过程中不应使柱干涸，用正己烷少量屡次淋洗浓缩瓶，一并注入层析柱。控制氧化铝表层吸附的色素带宽宜小于0.5cm，待样液完全流出后，视样品中含油类杂质的多少用10mL～30mL正己烷洗柱，直至流出液无色，弃去全部正己烷淋洗液，用含5%丙酮的正己烷液60mL洗脱，收集、浓缩后，用丙酮转移并定容至5mL，经0.45μm有机滤膜过滤后待测。 * 谢谢欣赏 2021-5-18 2. 红辣椒油、火锅料、奶油等油状样品 称取0.5 g～2g〔准确至0.001g〕样品于小烧杯中，参加适量正己烷溶解〔约1 mL～10mL〕，难溶解的样品可于正己烷中加温溶解。按1中“慢慢参加到氧化铝层析柱??过滤后待测〞操作。 3. 辣椒酱、番茄沙司等含水量较大的样品 称取10 g～20g〔准确至0.01g〕样品于离心管中，加10mL～20mL水将其分散成糊状，含增稠剂的样品多加水，参加30mL正己烷：丙酮 = 3：1，匀浆5min, 3000rpm离心10min, 吸出正己烷层，于下层再参加20mL×2次正己烷匀浆，离心，合并3次正己烷，参加无水硫酸钠5g 脱水，过滤后于旋转蒸发仪上蒸干并保持5分钟，用5mL正己烷溶解残渣后，按1中“慢慢参加到氧化铝层析柱??过滤后待测〞操作。 * 谢谢欣赏 2021-5-18 4. 香肠等肉制品 称取粉碎样品10g～20g〔准确至0.01g〕于三角瓶中，参加60mL正己烷充分匀浆5min，滤出清液，再以20mL×2次正己烷匀浆，过滤。合并3次滤液，参加5g无水硫酸钠脱水，过滤后于旋转蒸发仪上蒸至5mL以下，按1中“慢慢参加到氧化铝层析柱中??过滤后待测〞操作。 * 谢谢欣赏 2021-5-18 推荐色谱条件 1. 仪器条件 ?? 色谱柱： Zorbbbaaax SB-C18 3.5 μm 4.6mm×150mm 〔或相当型号色谱柱〕 ?? 流动相：溶剂A 0.1%甲酸的水溶液：乙腈 = 85：15; 溶剂B 0.1%甲酸的乙腈溶液：丙酮=80：20 ?? 梯度洗脱：流速:1mL/min 柱温：30℃ 检测波长：苏丹红Ⅰ 478nm ；苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红Ⅳ 520nm ；于苏丹红Ⅰ出峰后切换。进样量10μl。 2. 标准曲线 吸取标准储藏液0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6mL ，用正己烷定容至25mL，此标准系列浓度为0、0.16、0.32、0.64、1.28、2.56μg/mL,绘制标准曲线。 3. 计算 按公式〔1〕计算苏丹红含量 R=C×V /M ······〔1〕 R—样品中苏丹红含量，单位为毫克每千克〔mg/kg〕； C—由标准曲线得出的样液中苏丹红的浓度 (μg/mL)； V—样液定容体积，单位为毫升〔mL〕； M—样品质量，单位为克〔g〕。 * 谢谢欣赏 2021-5-18 苏丹红标准色谱图 * 谢谢欣赏 2021-5-18 孔雀石绿 一种带有金属光泽的绿色结晶体，又名碱性绿、孔雀绿，易溶于水，溶液呈蓝绿色。孔雀石绿是一种有效杀灭霉菌的染料类药物，具有相当好的杀真菌效果。由于鱼类在运输中易发生碰撞，造成鱼鳞脱落而引起鱼体真菌感染，以致出现霉烂、死亡等现象，孔雀石绿恰恰可以治疗这些鱼类碰撞伤。因价格廉、容易得、用量少、疗效高，在过去水产养殖疾病防治中曾被广泛使用。一些不法商贩滥用孔雀石绿，包括在运输前使用孔雀石绿溶液对车厢进行消毒，不少储放活鱼的鱼池也采用这种方式进行消毒。 * 谢谢欣赏 2021-5-18 科研结果说明，孔雀石绿具有高毒素、高残留和致癌、致畸、致突变等副作用，有“苏丹红第二〞之称。鉴于孔雀石绿的危害性，美国、英国、日本等许多国家已禁止将其用于水产养殖业。我国也于2002年5月将孔雀石绿列入?食品动物禁用的兽药及其化合物清单?中，禁止用