细胞生物学：第六章－线粒体和叶绿体.pptVIP

（三）光合碳同化 CO2 fixation and photorespiration(光呼吸) in C3 plants 第三节 线粒体和叶绿体是半自主性细胞器 第四节 线粒体和叶绿体的增殖与起源 Electron transport in the thylakoid membrane Rubisco (关键酶) Leaf anatomy of C4 plants and the C4 pathway 第三节 线粒体与叶绿体的蛋白质定向转运 一、线粒体蛋白质的转运 用标记氨基酸培养细胞，用氯霉素和放线菌酮分别抑制线粒体和细胞质的蛋白合成，发现人mtDNA仅编码13条多肽： 细胞色素c氧化酶的3个亚基，F0的2个亚基，NADH脱氢酶的7个亚基和细胞色素b。 线粒体含1000多种蛋白，绝大多数由核基因编码，在细胞质中合成，定向转运至线粒体。 前体蛋白在运输前，以未折叠形式存在，N端的一段信号序列称为导肽或引肽，完成转运后被酶切除，成为成熟蛋白，这种现象称后转译。 信号肽特点： 多位于肽链N端，约20个氨基酸构成； 形成两性α螺旋，带正电荷的氨基酸残基和不带电荷的疏水氨基酸残基分别位于螺旋两侧； 对所牵引的蛋白质没有特异性要求。 三、氧化磷酸化的作用机理 （一）质子动力势 Mitchell(1961)提出“化学渗透假说”。认为： 电子沿呼吸链传递时，所释放的能量将质子从内膜基质侧(M侧)泵至膜间隙(C侧)，形成质子动力势（ △P）。 △P=Ψ-(2.3RT/F)△pH 其中：△pH= pH梯度， Ψ =电位梯度，T=绝对温度，R=气体常数，F为法拉第常数，当温度为25℃时△P的值为220mV左右。 Chemiosmotic Theory （二）ATP合酶（ATP synthase） F-型质子泵；分为球形的F1（头部）和嵌入膜中的F0（基部）。 F1：α3β3γδε复合体，具有3个ATP合成的催化位点（每个β亚基1个）。 F0：ab2c12复合体，嵌入内膜，12个c亚基组成一个环形结构，具有质子通道。 ATP synthase 1979年Boyer提出构象耦联假说。其要点为： 1．ATP酶利用质子动力势，催化ATP合成。 2．F1有3个催化位点，催化位点有3种构象。 3．质子通过F0时，引起c亚基构成的环旋转，带动γ亚基旋转，γ亚基端部高度不对称，引起β亚基3个催化位点构象的周期性变化（L、T、O），不断将ADP和Pi加合在一起，形成ATP。 支持构象耦联假说的实验： 吉田（Massasuke Yoshida）等 （三）P/O值 指每消耗一个氧原子所产生的ATP分子数，它表示氧化磷酸化的效率。 通常认为NADH／2.5 ，FADH2／1.5 。 （四）氧化磷酸化抑制剂 1．电子传递抑制剂 抑制复合物I，如阿米妥、鱼藤酮。 Amytal rotenone 抑制复合物II，如：2-噻吩甲酰三氟丙酮和萎锈灵。 2-Thenoyltrifluoroacetone carboxin 抑制复合物III，如抗霉素A 。 Antinomycin A 1 抑制复合物IV，如CO、CN、NaN3、H2S。 电子传递抑制剂可用来研究呼吸链各组分的排列顺序，当呼吸链某一特定部位被抑制后，底物一侧均为还原状态，氧一侧均为氧化态，可用分光光度计检测。 2．磷酸化抑制剂 与F0结合，阻断H+通道。如寡霉素。 oligomycin 3．解偶联剂（uncoupler） 解偶联蛋白(UCPs)：位于动物棕色脂肪组织和肌肉线粒体，与维持体温有关。 质子载体： 2，4-二硝基酚 (DNP)、羰基-氰-对-三氟甲氧基苯肼 (FCCP)。 质子通道：增温素。 第二节 叶绿体与光合作用 光合作用是地球上有机体生存和发展的根本源泉。 绿色植物年产干物质达1014公斤。 一、形态与结构 状如透镜，长径5~10，短径2~4，厚2~3um。 叶肉细胞含50~200个，占细胞质的40%。 由外被、类囊体和基质3部分组成。含3种不同的膜：外膜、内膜、类囊体膜；3种彼此分开的腔：膜间隙、基质和类囊体腔。 Chloroplast （一）叶绿体外被 双层膜组成，膜间为10~20nm的间隙。 外膜的通透性大，内膜通透性低；ADP、ATP、 NADP+、葡萄糖和焦磷酸等需要特殊的转运体才能通过内膜。 （二） 类囊体 类囊体膜：流动性高，内在蛋白有：细胞色素b6／f复合体、集光复合体(LHC)、质体醌(PQ)、质体蓝素(PC)、铁氧化还原蛋白(FD)、黄素蛋白、光系统I、II复合物。 基粒：扁平小囊堆叠而成，含40~60个。 基质类囊体：连接基粒的没有堆叠的类囊体。 （三）基质 内膜与类囊体之间的空间，主要成分包括： 碳同化相关的酶类：如RuBP羧化酶。 叶绿体DNA、蛋白质合成体系。 一