基因工程的基本操作程序.pptxVIP

1．2　基因工程的基本操作程序;学习导航 1.掌握目的基因获取的常见方法。 [难点] 2.学会基因表达载体构建的方法和要求。 [重点] 3.理解目的基因导入受体细胞的具体过程。 4.掌握目的基因检测与鉴定的具体操作。 [要点];;基因文库包括两种：________文库，即包含一种生物所有基因的文库；__________文库,即只包含一种生物的一部分基因的文库，如cDNA文库。 2.利用PCR技术扩增目的基因 (1)PCR的含义：是一项在生物______复制特定DNA片段的核酸合成技术。 (2)目的：短时间内大量扩增目的基因。 (3)原理：________________。;(4)过程： 第一步：加热至90～95℃,_______________ ; 第二步：冷却至_________℃，引物与两条单链DNA相应互补序列结合； 第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶(Taq酶)从引物起始进行互补链的合成。 如此重复循环多次。 (5)特点：指数形式扩增。;想一想 1．PCR过程中，需要解旋酶吗？所需要的DNA聚合酶应具有什么特点？ 【提示】　PCR过程中，DNA双链解开是在高温下完成的，不需要解旋酶；由于PCR过程温度较高，所以需要能耐高温的DNA聚合酶。;3.用化学方法人工合成 如果基因比较___,核苷酸序列又已知,也可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。 二、基因表达载