串联质谱气相色谱质谱结果解读.pptVIP

脂肪酸氧化代谢病相关酰基肉碱（中链、长链酰基肉碱） C0：游离肉碱 C8：辛酰肉碱 C10：葵酰肉碱 C12：月桂酰肉碱 C14：肉豆蔻酰基肉碱 C14:1：肉豆蔻烯酰基肉碱 C16：棕榈酰基肉碱 C16OH：3-羟基棕榈酰基肉碱 C18：十八碳酰基肉碱 C18OH：3-羟基十八碳酰基肉碱 第三十一页，共49页 线粒体脂肪酸?β-氧化代谢途径 细胞膜 胞浆 肉碱转运蛋白 脂肪酸 肉碱 肉碱 C12-C16 注：小于C8的脂肪酸不需肉碱传递？ 第三十二页，共49页 游离肉碱[C0、C0/(C16+C18)] □ C0增高 ?肉碱棕榈酰转移酶-I缺乏症（其他酰基肉碱正常，或降低） ?继发于肝功能损伤（伴其他多种酰基肉碱增高） ?静滴或口服左旋肉碱 □ C0降低 ?原发性肉碱缺乏症（伴多种酰基肉碱降低） ?继发于营养不良，有机酸血症，脂肪酸氧化代谢病，母源性肉碱缺乏症 第三十三页，共49页 辛酰肉碱增高（C8、C8/C3） □中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症 （C8增高，C10正常，C8/C10增高） □多种酰基辅酶A脱氢酶缺乏症 （C8、C10均增高，C8/C10正常） 第三十四页，共49页 多种酰基肉碱增高（C6、C8、C10、C12、C14、C16、C18） 多种酰基辅酶A脱氢酶缺乏症 肉碱棕榈酰转移酶-II缺乏症 肉碱/酰基肉碱移位酶缺乏症 继发于肝功损伤（伴C0、C2增高） 第三十五页，共49页 第一页，共49页 遗传代谢病简介 基因突变导致维持机体正常代谢所必需的某些酶、受体或载体等缺乏发生的疾病 多为单基因遗传病 大部分属于常染色体隐形遗传病，部分属于伴性遗传 遗传代谢病病种繁多，目前已发现近3000余，单病发病率低，但总体发病率可达活产婴儿的1/500 第二页，共49页 遗传代谢病发病机制 正常代谢途径 代谢物（A） 代谢物（B） X 酶 代谢物（A1） 代谢物（A2） 异常代谢途径 辅酶（C） 代谢物（C1） 代谢物（C2） 代谢物（B1） 代谢物（B2） 第三页，共49页 遗传代谢病的分类 氨基酸代谢病：苯丙酮尿症、枫糖尿病、酪氨酸血症、同型胱氨酸尿症、非酮性高甘氨酸血症 尿素循环障碍：鸟氨酸氨甲酰转移酶缺乏症、瓜氨酸血症、精氨酸琥珀酸血症、精氨酸血症 有机酸代谢病：甲基丙二酸血症、丙酸血症、异戊酸血症、戊二酸血症、多种羧化酶缺乏症等 脂肪酸代谢（?β氧化）病：短链、中链、极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症，原发性肉碱缺乏症等 糖代谢病：糖原累积病、G6PD缺乏症、半乳糖血症等 溶酶体贮积症：粘多糖病、戈谢病、尼曼皮克病等 其他：先天性肾上腺皮质增生症、肝豆状核变性等 第四页，共49页 串联质谱技术（tandem mass spectrometry，MS/MS） 质谱仪：通过检测物质的质量与电荷比（m/z），对物质进行定性和定量的分析仪器 串联质谱仪：有两个质谱串联而成的二级质谱 第五页，共49页 串联质谱遗传代谢病检测样品处理方法-衍生法 3mm(3.2ul全血)血滤纸片（96孔过滤板） 100ul甲醇（含内标），轻摇20min(萃取) 离心至另一96孔聚丙烯板 55℃吹干 60ul盐酸正丁醇，65℃,15min（衍生，丁酯化） 55℃吹干 100ul乙腈：水（80:20） 上机进样（每次20ul）检测 （2min检测1个样品） 第六页，共49页 串联质谱检测结果 检测60余种氨基酸和酰基肉碱 可设置40余个氨基酸或酰基肉碱之间的比值 筛查或检测45种疾病 国际：1991年（美国） 国内：2002年（新华医院，儿研所） 第七页，共49页 血氨基酸检测结果 血氨基酸增高： 不同氨基酸增高，可代表一种疾病或几种疾病 一种疾病可有多种氨基酸增高 血氨基酸降低： 多继发于营养不良（蛋氨酸及瓜氨酸除外） 第八页，共49页 苯丙氨酸增高（Phe、Phe/Tyr） 高苯丙氨酸血症（单纯Phe增高） 希特林蛋白缺乏症（同时Cit、Met增高） 酪氨酸血症（同时Tyr增高） 静滴氨基酸（伴多种氨基酸增高） 第九页，共49页 高苯丙氨酸血症（HPA） □发病机制： 苯丙氨酸（Phe） 酪氨酸（Tyr） 苯丙氨酸羟化酶 X 四氢生物蝶呤（BH4） 苯丙酮酸 多巴 苯乙酸 苯乳酸 黑色素 多巴胺 肾上腺素 □患病率：1:10,000 第十页，共49页 酪氨酸增高（Tyr、Tyr/Phe） 酪氨酸血症I，II，III型 希特