亲和层析技术.pptVIP

* 叠氮化法 聚丙烯酰胺的酰肼衍生物，加1mol/L的亚硝酸，反应液搅90s； 加入脂肪胺类配基，制得亲和吸附剂。 * * 第三十一页，共82页 * 重氮化法 ω-氨基烷基琼脂糖衍生物，对硝基苯甲酰氯反应，制得对硝基苯甲酰胺烷基琼脂糖衍生物。 用连二亚硫酸钠还原，亚硝酸钠处理，得重氮盐衍生物。 配基与重氮盐衍生物偶联，制得亲和层析柱。 * * 第三十二页，共82页 * 碳二亚胺缩合法 碳二亚胺为羧基活化剂。 反应中的脲衍生物可用有机溶剂洗涤除去。 * * 第三十三页，共82页 * （三）、用于固定化配基的凝胶衍生物 1、CNBr活化的Sepharose 4B Sepharose 4B经CNBr活化，可偶联蛋白和核酸类配基。 2、AH-Sepharose 4B和CH-Sepharose 4B 含有6个碳原子的”手臂”的琼脂糖衍生物 AH-Sepharose 4B用于含有羧基的一类配基。 CH-Sepharose 4B能与含有一级氨基的配基偶联。 * * 第三十四页，共82页 * * * 第三十五页，共82页 * 3、环氧活化型Sepharose 6B 由亲水“手臂”与Sepharose 6B载体通过醚链形成的衍生物。 用于小分子配基的固定化。 用于偶联脂多糖、蛋白等大分子配基。 * * 第三十六页，共82页 * 4、活化型亲和胶10和15 由N-羟琥珀酰亚胺与琼脂糖衍生