植物脱毒技术 PPT课件.pptVIP

3、微型薯生产技术 单茎段扩大繁殖 茎段带有1-2个叶片和液芽 22℃、16h、1000lx； 微型薯诱导 激素、黑暗、温度 CIP：MS+CCC、BA 香豆素代替CCC、BA；白糖代替蔗糖 试管繁殖图示 温室和底网畦生产微型薯 草莓 病毒种类 草莓镶脉病毒(SVBV)、草莓斑驳病毒(SMoV)、草莓轻型黄边病毒(SMY- EV)、草莓皱缩病毒(SCrV) 热处理法脱毒 茎尖培养脱毒 二、果树 苹果 营养繁殖为主，一旦被病毒侵染，终生带毒 苹果病毒通过嫁接传染，随着接穗、砧木、苗木远距离传播 病毒在细胞内寄生和增值，传染到树体其他部位，破坏树体正常生理机能，长势减退，产量下降，品质变劣，直至死亡。 1、苹果病毒的种类 非潜隐性病毒 潜隐性病毒 苹果退绿叶斑病毒、苹果茎痘病毒、苹果茎沟病毒 我国主产区病毒：苹果锈果类病毒、苹果花叶病毒、绿皱果病毒、退绿叶斑病毒、茎痘病毒、茎沟病毒。 2、离体繁殖技术 步骤： 外植体接种 起始培养形成芽丛和嫩茎 继代培养 生根培养 驯化移栽 （1）外植体培养物的建立和起始培养 1）外植体的来源 茎尖和茎段 2）适宜的取材时间和预处理 叶芽萌动——发育枝中上段——流水冲洗——单芽——剥鳞片——表面消毒——冲洗——剥离茎尖——接种 3）培养条件 BA0.5-1.5；NAA0.01-0.05 第三章 植物脱毒技术茎尖分生组织培养 为什么要培育脱毒苗？ 由病毒引起植物产量和品质退化的事例甚多。多数植物都受到一种或几种病毒侵染，且带毒株比率高。病毒对寄主植物造成毁灭性危害,导致大幅度减产,甚至全株死亡。潜隐性病毒侵染植物造成症状不明显的慢性危害，不易被发现，尤其危险。受病毒侵染的植物全身终身带毒，目前尚无有效药物可以治愈。利用植物茎尖等方法脱毒，培育无病毒苗，是解决病毒危害的有效途径。 什么叫无病毒苗？ 是指不含该种植物的主要危害病毒，即经检测主要病毒在植物内的存在表现阴性反应的苗木。要脱除植物体内所有病毒包括未知病毒是不可能的，准确地说“无病毒苗”是指“特定无病毒”。对被病毒侵染的植物优良品种的植株进行脱毒，培育出无病毒母株，并在不易受再侵染的条件下无性繁殖，是获得无病毒苗的根本途径。 烟草黄瓜花叶病毒“脉坏死症” 感 染 病 毒 病 的 郁 金 香 第一节 茎尖培养脱毒 一、病毒在植物体内的分布 病毒侵染到植株的叶片后,经过一段时间,即向附近细胞增殖转移,转移速度很慢,每小时只有几微米。当叶片内病毒浓度增大到一定量时,就转移到韧皮部,随后通过维管束转移到其他部分。 由于植株生长点附近病毒的浓度很低，甚至没有。所以，应用茎尖培养脱毒研究获得成功。由于茎尖培养脱毒效果好，后代遗传性稳定，所以是目前生产上最常用的脱毒措施。 为什么茎尖培养能够除去病毒？ 一是病毒运转速度慢。 二是茎尖分生组织没有维管束，病毒只能通过胞间连丝传递，赶不上细胞分裂和生长的速度，所以生长点的病毒数量极少，几乎测不出来。 进行茎尖培养时，切取茎尖越小，带有病毒的可能性越小，但太小不易成活。 不同种类的植物带有的不同病毒，切取茎尖的大小也不相同。 如马铃薯Y病毒，切取茎尖长度1.0-3.0mm,马铃薯X病毒，切取茎尖长度0.2-0.5mm，除可除去病毒外，尚可除去其他病原体。 二、无病毒苗的获得 （一）茎尖剥离 取幼苗茎尖2-3cm小段，剥去可见大叶，放在烧杯内，用自来水冲洗1小时左右，移入无菌室进行严格消毒，先用75%酒精快速浸泡一下，再放入5%的漂白粉溶液内消毒7-10min，然后用无菌水冲洗3-4次。 在双筒解剖镜下剥去幼叶，最后露出圆滑的生长点，用注射的针头侧刃或自制的解剖针，仔细地切取带有1-2个叶原基的生长点，随即接种到三角瓶内的培养基上进行培养，这样的外植体（生长点带1-2个叶原基）的培养，严格地说，应称为分生组织培养。以上操作必须在无菌条件下进行。 （二）培养 常用MS或White培养基。在培养基中可酌情加5%-10%椰乳，0.1-1.0mg/L的IAA、NAA、6-BA等，有的还要加活性炭。 （三）提高脱毒效果 切取茎尖进行组培前，进行预处理，可以提高脱毒效果。 1.高温处理 又称温热疗法。某些病毒受热以后，不稳定，失去活性，病毒部分或全部钝化。 2.低温处理 又称冷疗法。 如菊花在5℃条件下分别处理4个月或7.5个月，没有菊花矮化病毒（CSV）的无病毒苗分别是67%和73%。 3.化学处理 又称化学疗